బాక్టీరియాలజీ & పారాసిటాలజీ జర్నల్

నైరూప్య

బ్రూగియా మలాయిలో ఎంబ్రియోజెనిసిస్ సమయంలో వోల్బాచియాను స్థానికీకరించడానికి సిటు హైబ్రిడైజేషన్ యొక్క ఉపయోగం

దావోజున్ జియాంగ్, పీటర్ యు. ఫిషర్ మరియు గ్యారీ జె.వెయిల్

వోల్బాచియా అనేది చాలా ఫైలేరియల్ నెమటోడ్‌లలో అభివృద్ధి మరియు పునరుత్పత్తికి అవసరమైన కణాంతర బ్యాక్టీరియా. ఫైలేరియల్ బయాలజీలో వోల్బాచియా పాత్రపై అవగాహనను మెరుగుపరచడానికి కొత్త విధానాలు అవసరం. ఫ్లోరోసెంట్ ఇమ్యునోహిస్టాలజీని ఉపయోగించి ఇటీవలి అధ్యయనాలు బ్రూగియా మలై యొక్క ప్రారంభ పిండాలలో వోల్బాచియా యొక్క అసమాన విభజనను వెల్లడించాయి మరియు ఇది వయోజన పురుగులలో వోల్బాచియా యొక్క నిరోధిత పంపిణీని వివరించడానికి సహాయపడుతుంది. అయినప్పటికీ, పిండం అభివృద్ధి యొక్క చివరి దశలలో లేదా ఇన్ఫెక్టివ్ లార్వా (L3)లో వోల్బాచియా పంపిణీ ఎక్కువగా తెలియదు. ఈ అధ్యయనంలో మేము బి. మలైలో ఎంబ్రియోజెనిసిస్ మరియు మోర్ఫోజెనిసిస్ సమయంలో వోల్బాచియా మరియు వోల్బాచియా జన్యు వ్యక్తీకరణలను స్థానికీకరించడానికి ఇన్ సిటు హైబ్రిడైజేషన్ (ISH) ఉపయోగాన్ని అన్వేషించాము.

16S rRNA ప్రోబ్‌తో ISH B. మలై స్త్రీ ఒర్మ్స్ యొక్క పార్శ్వ త్రాడులు, ఓసైట్లు మరియు పిండాలలో వోల్బాచియాను వెల్లడించింది. ఇమ్యునోహిస్టాలజీ ద్వారా వోల్బాచియాను గుర్తించిన ముందస్తు అధ్యయనాలకు ఇది స్థిరంగా ఉంది. Wolbachia ఉపరితల ప్రోటీన్ జన్యువు (wsp) మరియు Wolbachia హేమ్ బయోసింథటిక్ పాత్వే జన్యువు (hemE) కోసం ప్రోబ్స్‌తో ISH ఈ జన్యువులు ప్రారంభ పిండాలలో బలంగా వ్యక్తీకరించబడినట్లు చూపించాయి కాని తరువాతి దశ పిండాలలో ("కామా", "జంతికలు" లేదా విస్తరించిన ఇంట్రాటూరైన్ మైక్రోఫైలేరియా) . 16S rRNA ప్రోబ్‌తో ISHని ఉపయోగించి B. మలయి పిండాలలో వోల్‌బాచియా పంపిణీకి సంబంధించిన ఒక వివరణాత్మక అధ్యయనం, ప్రారంభ పిండాలలో (మోరులే) వోల్‌బాచియా యొక్క అసమాన విభజనను నమోదు చేసింది మరియు వోల్‌బాచియా కేవలం హైపోడెర్మల్ త్రాడు పూర్వగామి కణాలలో మాత్రమే తదుపరి దశలో ఉన్న పిండాలలో (" కామా” దశ లేదా తరువాత). మోర్ఫోజెనిసిస్ సమయంలో వోల్బాచియా యొక్క క్రమక్రమంగా పరిమితం చేయబడిన స్థానికీకరణ L3లోని జననేంద్రియ ప్రైమోర్డియం నుండి వోల్బాచియా ఎందుకు లేదు అని వివరించవచ్చు.

వోల్బాచియా పంపిణీ మరియు జన్యు వ్యక్తీకరణ ఫైలేరియల్ పిండం అభివృద్ధి సమయంలో మరియు పురుగు యొక్క జీవిత చక్రంలో నాటకీయంగా మారుతూ ఉంటాయి. వోల్బాచియా యొక్క కణజాల-నిర్దిష్ట జనాభా డైనమిక్స్‌ను అర్థం చేసుకోవడానికి మరియు నెమటోడ్ హోస్ట్ నుండి వచ్చే సంకేతాలు ఈ బ్యాక్టీరియాలో పెరుగుదల, పంపిణీ మరియు జన్యు వ్యక్తీకరణను ఎలా ప్రభావితం చేస్తాయో అన్వేషించడానికి అదనపు పరిశోధన అవసరం.