బయోమోలిక్యులర్ రీసెర్చ్ & థెరప్యూటిక్స్ జర్నల్

నైరూప్య

క్రోమాటోగ్రాఫిక్ కాలమ్‌లో ఏకకాల మానవ FVIII/vWF శుద్దీకరణ మరియు వైరస్ నిష్క్రియం

సెర్గి పి హవ్రిలియుక్, ఇవ్జెనియా ఎం క్రాస్నోబ్రిజా, ఒలేనా ఎస్ హవ్రిలియుక్ మరియు జార్జి ఎల్ వోల్కోవ్

స్వేచ్ఛ యొక్క డిగ్రీల సంఖ్య తగ్గడం ప్రోటీన్ యొక్క డీనాటరేషన్‌ను నిరోధిస్తుందని అందరికీ తెలుసు. మునుపటి పరిశోధనలో, క్రోమాటోగ్రాఫిక్ జెల్ బైండింగ్ ప్రొటీన్ ప్రొటీన్ స్వేచ్ఛ డిగ్రీల సంఖ్యను తగ్గించే ఏజెంట్‌గా పనిచేస్తుందని మేము చూపించాము. అదనంగా, కొత్త అభివృద్ధి చెందిన జెల్‌ల యొక్క అధిక డైనమిక్ సామర్థ్యం క్రోమాటోగ్రాఫిక్ ప్రక్రియ యొక్క ఎత్తైన ఉష్ణోగ్రత వద్ద పెప్టైడ్/ప్రోటీన్ యొక్క సంతృప్తికరమైన నిలుపుదలని అందించింది. ఈ రెండు కారకాలు పెప్టైడ్ (స్ట్రెప్టోకినేస్ ఫ్రాగ్మెంట్ SK1-61) మరియు తక్కువ (మిల్క్ లైసోజైమ్) మరియు సగటు (పాము విషం నుండి ఫైబ్రినోజెనోలిటిక్ ఎంజైమ్) పరమాణు బరువు ప్రోటీన్ కోసం నేరుగా లక్ష్యాలను వేరుచేసే సమయంలో వైరస్ నిష్క్రియం చేయడానికి అనుమతించాయి. ఈ అధ్యయనం యొక్క లక్ష్యం వైరస్ నిష్క్రియం సమయంలో నేరుగా క్రోమాటోగ్రాఫిక్ కాలమ్‌లో అయాన్ ఎక్స్ఛేంజ్ మరియు అఫినిటీ జెల్‌లతో కట్టుబడి ఉండే అధిక మాలిక్యులర్ వెయిట్ కాంప్లెక్స్ FVIII/vWF యొక్క కార్యాచరణను సేవ్ చేసే అవకాశంపై పరిశోధన. మరొక లక్ష్యం ఏమిటంటే, బైండింగ్ ప్రోటీన్ యాడ్సోర్బెంట్ వైరస్‌లను సంక్రమించే యాంత్రిక వాష్‌కు నమ్మకమైన “జల్లెడ” వలె పనిచేస్తుందని చూపించడం. వివిధ క్రోమాటోగ్రాఫిక్, ఫోటోమెట్రిక్, RT-PCR విధానాలను ఉపయోగించి యాడ్సోర్బెంట్ యొక్క అధిక ఉష్ణోగ్రత-ఆధారిత సామర్థ్యాన్ని నిర్ణయించే అధిక డైనమిక్ సామర్థ్యం, ​​నేరుగా ద్రావకం/డిటర్జెంట్ ట్రీట్‌మెంట్ ద్వారా వైరస్-క్రియారహితం చేసే కాంప్లెక్స్ FVIII/vWFని నిర్వహించడానికి అనుమతించిందని కనుగొనబడింది. దీర్ఘకాలం 3-5 గంటల సమయంలో 40-50°C ఉష్ణోగ్రత వద్ద క్రోమాటోగ్రాఫిక్ కాలమ్. FVIII జీవసంబంధ కార్యకలాపాలు పూర్తిగా సంరక్షించబడ్డాయి; ఎన్వలప్డ్ మరియు ఎన్వలప్డ్ వైరస్లు సమర్థవంతంగా తొలగించబడ్డాయి. ఫార్మాస్యూటికల్ పరిశ్రమలో ఉపయోగించడానికి ఈ పద్ధతిని సిఫార్సు చేయడానికి మాకు అనుమతించిన వైరస్ల పూర్తి నిష్క్రియం కోసం మోడలింగ్ వైరస్ తొలగింపు స్థాయి సరిపోతుంది.