టటియానా లోపాటినా, అరోరా మజ్జియో, స్టెఫానియా బ్రూనో, సిరో టెట్టా, నటాలియా కాలినినా, రెనాటో రోమాగ్నోలి, మౌరో సాలిజోని, మాసిమో పోర్టా మరియు గియోవన్నీ కాముస్సీ
లక్ష్యం: సంస్కృతిలో కొవ్వు-ఉత్పన్నమైన మెసెన్చైమల్ స్టెమ్ సెల్స్ (ASCs) ద్వారా స్రవించే ఎక్స్ట్రాసెల్యులర్ వెసికిల్స్ (EVలు) యొక్క యాంజియోజెనిక్ లక్షణాలపై ప్రాథమిక ఫైబ్రోబ్లాస్ట్ గ్రోత్ ఫ్యాక్టర్ (bFGF) యొక్క ప్రభావాలను పరిశోధించడం ప్రస్తుత అధ్యయనం యొక్క లక్ష్యం .
పద్ధతులు: మేము BFGF (FGF-EVలు)తో లేదా bFGF (b-EVలు) లేకుండా కల్చర్ చేయబడిన ASC (ASC-EVలు) నుండి EVలను వేరు చేసాము. మేము మానవ మైక్రోవాస్కులర్ ఎండోథెలియల్ కణాలపై (HMEC) EV యాంజియోజెనిక్ చర్యను కేశనాళిక నిర్మాణ నిర్మాణ పరీక్ష ద్వారా మరియు వివోలో SCID ఎలుకలలో HMEC-కలిగిన మ్యాట్రిజెల్ను సబ్కటానియస్ ఇంజెక్షన్ ద్వారా పోల్చాము. మేము PCR శ్రేణి ద్వారా EVల యొక్క మైక్రో-RNA కూర్పును విశ్లేషించాము మరియు మేము bFGF స్టిమ్యులేషన్ తర్వాత మార్చబడిన రెండు mi-RNAలను ఎంచుకున్నాము: miR-223 మరియు miR-21. EVల చర్యను భర్తీ చేయడానికి మేము HMECని షార్ట్ యాంటిసెన్స్ యాంటీ-మిఆర్-223తో లేదా మిమిక్ మిఆర్-21తో బదిలీ చేసాము.
ఫలితాలు: విట్రోలో, B-EV స్టిమ్యులేషన్కు సంబంధించి FGF-EV ఉత్తేజిత HMEC ద్వారా ఏర్పడిన నౌక-వంటి నిర్మాణాల యొక్క మొత్తం పొడవు మరియు శాఖల సంఖ్య గణనీయంగా తగ్గించబడింది మరియు నిర్మాణాలు b-EV స్టిమ్యులేషన్ తర్వాత కంటే గణనీయంగా పెద్దవిగా ఉన్నాయి. వివోలో, B-EV-ప్రేరేపిత HMEC ద్వారా ఏర్పడిన వాటితో పోలిస్తే FGF-EV-ప్రేరేపిత HMEC ద్వారా ఏర్పడిన నాళాలు గణనీయంగా తక్కువగా ఉన్నాయి, అయితే అవి పరిమాణంలో గణనీయంగా పెద్దవి మరియు మౌస్ స్మూత్ కండరానికి అనుకూలమైన కణాలను కలిగి ఉన్నాయి. యాంజియోజెనిక్ కారకాల యొక్క తగ్గిన వ్యక్తీకరణ ద్వారా వర్గీకరించబడిన ASCEV లలో bFGF పరమాణు మార్పులకు దారితీసిందని మేము కనుగొన్నాము . అంతేకాకుండా, bFGF స్టిమ్యులేషన్ యాంటీ-యాంజియోజెనిక్ miR-223 యొక్క వ్యక్తీకరణను అధిక-నియంత్రిస్తుంది మరియు ప్రో-యాంజియోజెనిక్ miR-21 స్థాయిని తగ్గించింది. FGFEVల యొక్క ప్రభావాలు miR-233 యొక్క నిరోధం మరియు miR-21 అనుకరణ ముగింపుల ద్వారా వ్యతిరేకించబడ్డాయి
: సంస్కృతి పరిస్థితులు ASC ఉత్పన్నమైన EVల యొక్క ప్రో-యాంజియోజెనిక్ కార్యాచరణను సవరించవచ్చని, వాటి ప్రోటీన్ మరియు RNA విషయాలను మారుస్తుందని ఫలితాలు సూచిస్తున్నాయి. ముఖ్యంగా, bFGF నౌకల సంఖ్య పెరుగుదల కంటే నౌకల స్థిరీకరణను ప్రేరేపించే EVల ఉత్పత్తిని ప్రేరేపిస్తుంది.