బయోకెమిస్ట్రీ & అనలిటికల్ బయోకెమిస్ట్రీ

నైరూప్య

ఉత్పరివర్తన ప్రోటీన్‌లను ఉపయోగించి పల్స్ ప్రోటీయోలిసిస్ ద్వారా హైపర్‌థెర్మోఫిలిక్ Tk-RNase H2 యొక్క స్లో అన్‌ఫోల్డింగ్ పాత్‌వే పరిశీలించబడింది

కనకో షిమా, ఐ నాగో, జున్ ఒకడా, సతోషి సనో మరియు కజుఫుమి టకానో

హైపర్‌థెర్మోఫిలిక్ ఆర్కియోన్ థర్మోకాకస్ కోడకరెన్సిస్ (Tk-RNase H2) నుండి రిబోన్యూక్లీస్ H2 విప్పడం చాలా నెమ్మదిగా ఉంది. మునుపటి పనిలో, Tk-RNase H2 అన్‌ఫోల్డింగ్ ఇంటర్మీడియట్‌లు, IA-, IB-, IC- మరియు ID-స్టేట్‌లు, 25 ° C వద్ద పల్స్ ప్రోటీయోలిసిస్ విశ్లేషణ ద్వారా గమనించబడ్డాయి, ఇక్కడ IB- మరియు IC- రాష్ట్రాలు నెమ్మదిగా ప్రధాన రూపాలు. ఈ ప్రోటీన్ యొక్క ముగుస్తున్న ప్రక్రియ. ఇక్కడ, మార్పుచెందగలవారిని ఉపయోగించి పల్స్ ప్రోటీయోలిసిస్ ద్వారా Tk-RNase H2 యొక్క నెమ్మదిగా ముగుస్తున్న మార్గాన్ని మేము పరిశీలించాము. స్థిరీకరించబడిన వేరియంట్, D7N కోసం, IA- మరియు IB-స్టేట్‌ల జీవితకాలం తగ్గింది కానీ IC-స్టేట్ 25°C వద్ద ముందుగా కనిపించింది, ఇది IC-స్టేట్ యొక్క స్థిరీకరణను సూచిస్తుంది. IA- మరియు IB-స్టేట్‌లు 25°C వద్ద అస్థిరమైన వేరియంట్, L33Aలో గమనించబడలేదు, అయితే అడవి-రకంలో ఈ రెండు రాష్ట్రాలు 50°C వద్ద అదృశ్యమయ్యాయి. అధిక ఉష్ణోగ్రతల వద్ద IC-స్టేట్ Tk-RNase H2 యొక్క నిజమైన స్థానిక స్థితి అని మా ఫలితాలు సూచిస్తున్నాయి, అయితే స్థానిక, IA- మరియు 25 ° C వద్ద IB- రాష్ట్రాలు తక్కువ ఉష్ణోగ్రతల వద్ద కృత్రిమ రూపాలు.