జర్నల్ ఆఫ్ ఫార్మకోజెనోమిక్స్ & ఫార్మాకోప్రొటోమిక్స్

నైరూప్య

లీష్మానియా యూకారియోటిక్ ట్రాన్స్‌లేషన్ ఇనిషియేషన్ ఫ్యాక్టర్ 4Aని లక్ష్యంగా చేసుకుని వర్చువల్ మరియు బయోకెమికల్ స్క్రీనింగ్‌ల ద్వారా నవల లీష్మానిసైడ్ అణువుల ఎంపిక మరియు బయోకెమికల్ క్యారెక్టరైజేషన్

Yosser Zina Abdelkrim

లీష్మానియాసిస్ చికిత్స కోసం నవల చిన్న మరియు చురుకైన అణువుల గుర్తింపు పరిశోధన ప్రాధాన్యతను కలిగి ఉంది. ఇక్కడ, మేము లీష్మానియా ఇన్ఫాంటమ్ ఇనిషియేషన్ ఫ్యాక్టర్ 4A (LieIF)ని సంభావ్య డ్రగ్ టార్గెట్‌గా లక్ష్యంగా చేసుకుని సిలికో పరిశోధనలు మరియు చిన్న అణువుల వర్చువల్ స్క్రీన్‌లలో మునుపటి వాటిని విస్తరిస్తాము. LieIF RNA హెలికేస్‌ల డెడ్-బాక్స్ కుటుంబానికి చెందినది. డెడ్-బాక్స్ ప్రొటీన్‌లు డంబెల్ ఆకారంతో అత్యంత సంరక్షించబడిన కోర్ స్ట్రక్చర్‌ను కలిగి ఉంటాయి, ఇవి రెండు, రీకాంబినెంట్ ప్రోటీన్ A (RecA)కి స్ట్రక్చరల్ హోమోలజీతో అనుసంధానించబడిన డొమైన్‌లను కలిగి ఉంటాయి
. ఈ కోర్ స్ట్రక్చర్ ATP-ఆధారిత RNA-బైండింగ్ అనుబంధం, RNA-ఆధారిత ATPase కార్యాచరణ మరియు ATP-ఆధారిత RNA అన్‌వైండింగ్ కార్యాచరణను అందిస్తుంది. LieIFని నిరోధించే అణువుల కోసం స్క్రీన్ చేయడానికి మైక్రోటైటర్ ప్లేట్‌లలో కలర్‌మెట్రిక్ పరీక్షను ఏర్పాటు చేయడానికి మేము ATPase కార్యాచరణను ఉపయోగించాము. మేము వర్చువల్ స్క్రీనింగ్‌ల ద్వారా గతంలో గుర్తించిన వందలాది అణువులను ఎంజైమాటిక్ కార్యాచరణకు ముఖ్యమైన LieIFలోని సైట్‌లకు బంధించే సామర్థ్యం కోసం పరీక్షించాము. మేము ఒక ఆసక్తికరమైన నిరోధకాన్ని కనుగొన్నాము:
1 μM LieIF కోసం 150 ± 15 μM యొక్క IC50 విలువతో 6-α/β-అమినోకోలెస్టానాల్ . ఈ సమ్మేళనం LieIF యొక్క RNA హెలికేస్ కార్యాచరణను కూడా నిరోధిస్తుంది. వ్యక్తిగత RecA-వంటి డొమైన్‌లు మరియు ఇతర ప్రొటీన్‌లతో హెలికేస్ పరీక్షలు మరియు ATPase పోటీ ప్రయోగాలు LieIFలో బహుళ బైండింగ్ సైట్‌లు ఉన్నాయని మరియు ప్రాథమిక బైండింగ్ సైట్ డొమైన్ 1లో సంరక్షించబడిన RNA-బైండింగ్ మూలాంశాలను కలిగి ఉందని సూచిస్తున్నాయి. 6-α/β-అమినోకోలెస్టానాల్ (6-α-అమినోకోలెస్టానాల్ మరియు 6-కెటోకోలెస్టానాల్) యొక్క గుర్తించబడిన పది రసాయన అనలాగ్‌లలో రెండు LieIF యొక్క ATPase కార్యాచరణపై నిరోధక ప్రభావాలను చూపించాయి. క్షీరదాల eIF4Aతో ఇలాంటి నిరోధక ప్రభావాలు గమనించబడ్డాయి, కానీ విభిన్న ప్రతిచర్య ప్రొఫైల్‌లతో. మూడు అణువులు ఎల్. ఇన్ఫాంటమ్ పరాన్నజీవుల యొక్క ప్రోమాస్టిగోట్స్ మరియు అమాస్టిగోట్‌లకు వ్యతిరేకంగా లీష్‌మేనియల్ వ్యతిరేక చర్యను చూపించాయి మరియు అవి మాక్రోఫేజ్‌ల పట్ల ముఖ్యమైనవి కాని విషాన్ని చూపించాయి. ఈ అధ్యయనం ఒక ఔషధ లక్ష్యం వలె LieIF యొక్క ధృవీకరణ వైపు మొదటి అడుగును ఏర్పరుస్తుంది. ఇది లీష్మానియా మరియు క్షీరదాల eIF4A ప్రోటీన్ల మధ్య జీవరసాయన వ్యత్యాసాలను ప్రదర్శిస్తుంది, ముఖ్యంగా ATPase పరీక్షలలో రోకాగ్లామైడ్ రెండు ప్రోటీన్‌లను వేర్వేరుగా ప్రభావితం చేస్తుందని చూపిస్తుంది. ముగింపులో, ఈ పని ఒక ఆశాజనకమైన లీష్‌మానిసైడ్ అణువును అందిస్తుంది: 6- అమినోకోలెస్టానాల్, కణాంతర అమాస్టిగోట్‌లపై 1 μM కంటే తక్కువ IC50 విలువ, తక్కువ విషపూరితం మరియు 20 కంటే ఎక్కువ ఎంపిక సూచికతో. తదుపరి విచారణ.