కాథరినా గుంథెర్, ఆంట్జే అప్పెల్ట్-మెన్జెల్, చీ కియోంగ్ క్వాక్, హేకే వాలెస్, మార్కో మెట్జెర్ మరియు ఫ్రాంక్ ఈడెన్హోఫర్
లక్ష్యం: మానవ ప్రేరిత ప్లూరిపోటెంట్ మూలకణాల (హైపిఎస్సి ) నుండి న్యూరల్ స్టెమ్ సెల్స్ (ఎన్ఎస్సి) ప్రేరణ రోగి-నిర్దిష్ట న్యూరానల్ మరియు గ్లియల్ కణాలను పొందేందుకు ఒక ముఖ్యమైన వ్యూహంగా అభివృద్ధి చేయబడింది. అనేక న్యూరల్ డిఫరెన్సియేషన్ ప్రోటోకాల్లు ప్రధానంగా ఎంబ్రియోయిడ్ బాడీ (EB) నిర్మాణం లేదా మాన్యువల్ న్యూరల్ రోసెట్ ఐసోలేషన్ వంటి శ్రమతో కూడిన ప్రయోగాలను కలిగి ఉంటాయి. ఈ అధ్యయనం యొక్క లక్ష్యం వేగవంతమైన న్యూరల్ ఇండక్షన్ ప్రోటోకాల్ను అభివృద్ధి చేయడం, ఇది గతంలో ప్రచురించిన మోనోలేయర్ విధానాన్ని సాధారణ సాగు పద్ధతులతో మిళితం చేస్తుంది.
పద్ధతులు మరియు ఫలితాలు: hiPSCలు 7 రోజులలోపు వేగవంతమైన మోనోలేయర్ డిఫరెన్సియేషన్ ప్రోటోకాల్ను ఉపయోగించి ఆదిమ NSCలుగా (pNSC) విభజించబడ్డాయి. pNSCలు 5 భాగాల వరకు విస్తరించబడ్డాయి మరియు ప్లూరిపోటెన్సీ జన్యువు POU5F1 యొక్క నియంత్రణను తగ్గించడాన్ని చూపించాయి మరియు SOX1, SOX2, Nestin మరియు PAX6 వంటి NSC గుర్తులను వ్యక్తీకరించాయి. రెండవ దశలో మేము FGF, EGF మరియు Wnt అగోనిస్ట్ CHIR99021తో అనుబంధంగా ఉన్న మీడియాలో కల్చర్ చేయడం ద్వారా విస్తృతంగా ఉపయోగించే FGF/EGF-ఆధారిత NSC స్థితికి pNSCలను స్వీకరించాము. ఈ పరిస్థితులలో, కణాలు రోసెట్టే లాంటి నిర్మాణాలకు వేగవంతమైన మరియు ప్రముఖమైన పదనిర్మాణ మార్పును పొందాయి. ఈ కణాలు 30 కంటే ఎక్కువ గద్యాలై విస్తరణలో ఉన్నాయి మరియు నాడీ మార్కర్ జన్యువుల వ్యక్తీకరణ ప్రొఫైల్ను నిర్వహించాయి. అంతేకాకుండా, వాటిని న్యూరాన్లతో పాటు GFAP- మరియు S100ß- పాజిటివ్ ఆస్ట్రోసైట్లుగా సమర్థవంతంగా విభజించవచ్చు.
ముగింపు: గతంలో ప్రచురించిన మోనోలేయర్ ప్రోటోకాల్లు మరియు సాధారణంగా ఉపయోగించే FGF/EGF-కలిగిన మీడియా పరిస్థితుల మధ్య అంతరాన్ని మూసివేస్తూ, hiPSC-ఉత్పన్నమైన NPCల ఉత్పత్తి కోసం మేము బలమైన రెండు-దశల న్యూరల్ ఇండక్షన్ ప్రోటోకాల్ను నివేదిస్తాము. వ్యాధి మోడలింగ్ మరియు సెల్ రీప్లేస్మెంట్ థెరపీ వంటి బయోమెడికల్ అప్లికేషన్ల కోసం రోగి-నిర్దిష్ట నాడీ కణాలను పొందేందుకు మా ప్రోటోకాల్ వేగవంతమైన మరియు సమర్థవంతమైన న్యూరల్ ఇండక్షన్ స్ట్రాటజీగా ఉపయోగపడుతుంది .