జర్నల్ ఆఫ్ బయోక్వివలెన్స్ & బయోఎవైలబిలిటీ

నైరూప్య

రాపిడ్ ఈక్విలిబ్రియం డయాలసిస్ (RED): మానవ మరియు ఎలుక ప్లాస్మాను ఉపయోగించి ప్లాస్మా ప్రోటీన్ బైండింగ్ కోసం ఇన్-విట్రో హై-త్రూపుట్ స్క్రీనింగ్ టెక్నిక్

జితేంద్ర కుమార్ సింగ్, అనంత్ సోలంకి, రీమా సి మనియార్, దేబరూప బెనర్జీ మరియు వికాస్ ఎస్ శిర్సాత్

ప్లాస్మా ప్రొటీన్‌లతో అణువు ఎంతవరకు బంధించబడుతుందో నిర్ణయించడం అనేది ఔషధ అభివృద్ధిలో కీలకమైన దశ, ఎందుకంటే ప్లాస్మా-బౌండ్ ఔషధం మొత్తం సమ్మేళనం మోతాదు, సమర్థత, క్లియరెన్స్ రేటు మరియు ఔషధ పరస్పర చర్యల సంభావ్యతను ప్రభావితం చేస్తుంది. ప్లాస్మాలో ఒక పరీక్షా వ్యాసం యొక్క ఉచిత (%Fu) మరియు కట్టుబడి (% బౌండ్) భిన్నాలను నిర్ణయించడం అనేది ఒక క్లిష్టమైన పరామితి, ఇది ఔషధ ఆవిష్కరణ మరియు అభివృద్ధి ప్రక్రియలో మామూలుగా నిర్ణయించబడుతుంది. ఈ నిర్ణయం సమతౌల్య డయాలసిస్ ద్వారా ప్రారంభించబడుతుంది, ఇది ప్లాస్మాలోని నాన్-బౌండ్ డ్రగ్ భిన్నం యొక్క విశ్వసనీయ అంచనా కోసం ఆమోదించబడిన మరియు ప్రామాణిక పద్ధతి. ఇది ప్రాధాన్య పద్ధతి అయినప్పటికీ, సమతౌల్య డయాలసిస్ అనేది చారిత్రాత్మకంగా శ్రమతో కూడుకున్నది, సమయం తీసుకునేది, ఖర్చుతో కూడుకున్నది మరియు స్వయంచాలకంగా చేయడం కష్టం. LC-MS/MS ఉపయోగించి ఒక రాపిడ్ ఈక్విలిబ్రియం డయాలసిస్ (RED) డ్రగ్-ప్రోటీన్ బైండింగ్ అస్సే ఒక నవల సాంకేతికతను ఉపయోగించి అభివృద్ధి చేయబడింది, దీని ఫలితంగా గణనీయంగా మెరుగైన పరీక్ష ఖచ్చితత్వం మరియు వేగ ప్రయోజనాన్ని అందిస్తుంది. ఆశించిన ప్రోటీన్ బైండింగ్ పరిధిని కవర్ చేసే సమ్మేళనాల ప్యానెల్ మానవ మరియు ఎలుక జాతుల ప్లాస్మాలో పరీక్షించబడింది. ప్రీ-ట్రీట్డ్ ప్లాస్మాలో అన్‌బౌండ్ డ్రగ్ యొక్క పరిమాణీకరణ కోసం ఎలక్ట్రో స్ప్రే అయనీకరణతో ఇంటర్‌ఫేస్ చేయబడిన క్వాడ్రపుల్ టాండమ్ మాస్ స్పెక్ట్రోఫోటోమీటర్‌ను ఉపయోగించి సున్నితమైన మరియు ఎంపిక చేసిన పద్ధతి అభివృద్ధి చేయబడింది. ఉపయోగించిన మొబైల్ దశలు అసిటోనిట్రైల్‌లో 0.1% ఫార్మిక్ ఆమ్లం: గ్రేడియంట్ HPLC పద్ధతితో నీటిలో 0.1% ఫార్మిక్ ఆమ్లం. ESI మోడ్‌లో నిర్వహించబడే మాస్ స్పెక్ట్రోమీటర్ ద్వారా ఔషధాల యొక్క అన్‌బౌండ్ భిన్నం కనుగొనబడింది. అదనంగా, పది సమ్మేళనాల సమితికి సంబంధించిన డేటా సాహిత్య విలువలతో పోల్చబడింది. వివరించిన పద్ధతితో, ఔషధ ఆవిష్కరణ వాతావరణంలో PPB కోసం సాపేక్షంగా పెద్ద సంఖ్యలో సమ్మేళనాలను పరీక్షించడం సాధ్యమవుతుంది.