జర్నల్ ఆఫ్ స్టెమ్ సెల్ రీసెర్చ్ & థెరపీ

నైరూప్య

ఫ్లో సైటోమెట్రీ మరియు రియల్ టైమ్ PCR ద్వారా అఫెరిసిస్ ఉత్పత్తులలో మెగాకార్యోసైటిక్ ప్రొజెనిటర్ల పరిమాణం

లీనో ఎవా, నీల్సన్ కాస్పర్ ఆర్, బేచ్ జాన్, స్టెఫెన్సెన్ రూడి, డైబ్కేర్ కరెన్, బోగ్‌స్టెడ్ మార్టిన్ మరియు జాన్సెన్ హన్స్ ఇ

నేపథ్యం మరియు లక్ష్యాలు: గ్రాఫ్ట్‌లోని CD34+/CD61+ మెగాకార్యోసైటిక్ ప్రొజెనిటర్‌ల గణన ద్వారా ఆటోలోగస్ పెరిఫెరల్ బ్లడ్ స్టెమ్ సెల్ ట్రాన్స్‌ప్లాంటేషన్ (PBSCT) నాణ్యత అంచనాను మెరుగుపరచవచ్చు. ఫ్లో సైటోమెట్రీ (FC) ద్వారా ఉపసమితుల గణన అనేది ప్లేట్‌లెట్ లేదా మైక్రోస్పియర్ అటెండరెన్స్ నుండి ఉత్పన్నమయ్యే తక్కువ నిర్దిష్టత కారణంగా ప్రామాణీకరించడం కష్టం. హేమాటోపోయిటిక్ మూలకణాలకు ప్లేట్‌లెట్ కట్టుబడి ఉండడాన్ని విశ్లేషించడం మరియు CD34 మరియు CD61 జన్యు ట్రాన్‌స్క్రిప్ట్‌ల కోసం పరిమాణాత్మక రియల్ టైమ్ పాలిమరేస్ చైన్ రియాక్షన్ (RT-qPCR) పరీక్షను ఏర్పాటు చేయడం మేము లక్ష్యంగా పెట్టుకున్నాము. నాన్-హాడ్కిన్ లింఫోమా (NHL)లో PBSCT తరువాత ఆలస్యంగా ప్లేట్‌లెట్ రికవరీ కోసం ప్రిడిక్టర్‌లుగా CD34 మరియు CD61లను అధ్యయనం చేయడానికి విశ్లేషణ ఉపయోగించబడింది. మెటీరియల్ మరియు పద్ధతులు: ఆటోలోగస్ ట్రాన్స్‌ప్లాంటేషన్ కోసం సేకరించిన అఫారెసిస్ ఉత్పత్తుల వద్ద FC విశ్లేషణ నిర్వహించబడింది మరియు క్రమబద్ధీకరించబడిన కణాలపై కన్ఫోకల్ మైక్రోస్కోపీ వర్తించబడుతుంది. క్లినికల్ మూల్యాంకనంలో అధిక మోతాదు చికిత్స మరియు PBSCTతో చికిత్స పొందిన 21 వరుస NHL రోగుల ల్యుకాఫెరిసిస్ ఉత్పత్తుల విశ్లేషణ ఉంది. ప్రారంభ పునరుద్ధరణ అనేది రోజు 12 పోస్ట్ మార్పిడికి ముందు గమనించిన ప్లేట్‌లెట్ కౌంట్>20x10(9)/Lగా మరియు 12వ రోజు పోస్ట్ ట్రాన్స్‌ప్లాంట్ తర్వాత గమనించిన ప్లేట్‌లెట్ కౌంట్ <20x10(9)/Lగా ఆలస్యంగా రికవరీగా నిర్వచించబడింది. RT-qPCR విశ్లేషణ కోసం CD34+ కణాలు కరిగించిన ల్యూకాఫెరిసిస్ ఉత్పత్తుల నుండి క్రమబద్ధీకరించబడ్డాయి మరియు TaqMan ప్రోబ్‌లను ఉపయోగించి CD34 మరియు CD61 mRNA స్థాయిల తదుపరి విశ్లేషణ కోసం RNA సంగ్రహించబడింది మరియు cDNAకి రివర్స్ లిప్యంతరీకరించబడింది. ఫలితాలు: FC ద్వారా గుర్తించబడిన CD34+/CD61+ కణాలు నిర్దిష్ట ఉపసమితిని ఏర్పరుస్తున్నట్లు చూపబడ్డాయి, అనుబంధిత పరిపక్వ ప్లేట్‌లెట్‌ల సంకేతాలు లేవు. CD34+/CD61+ కణాలు CD61 mRNA ట్రాన్స్‌క్రిప్ట్‌లను కాంప్లిమెంటరీ CD34+/ CD61- సెల్‌లలో కనుగొనబడలేదు. మెగాకార్యోసైటిక్ ప్రొజెనిటర్ ఉపసమితుల యొక్క FC ఆధారిత గణన మరియు RT-qPCR విశ్లేషణ అంచనాల మధ్య ఎటువంటి సానుకూల సహసంబంధం గుర్తించబడలేదు. ప్రారంభ మరియు ఆలస్యంగా ప్లేట్‌లెట్ రికవరీ ఉన్న 21 మంది రోగుల నుండి నమూనాలను పోల్చడం ద్వారా క్లినికల్ ప్రభావం యొక్క మూల్యాంకనం CD61/BACT (β-ఆక్టిన్), CD34/ BACT లేదా CD61/CD34 mRNA, CD34+ క్రమబద్ధీకరించబడిన కణాల మధ్య వ్యక్తీకరణ నిష్పత్తులకు ఎటువంటి అంచనా ప్రభావం చూపలేదు. ముగింపు మరియు దృక్పథం: CD34+/CD61+ కణాల నిర్దిష్ట ఉపసమితిని FC మరియు RTqPCR విశ్లేషణ ద్వారా గుర్తించవచ్చు; అయితే ఈ ఉపసమితి యొక్క గణన PBSCT తర్వాత ప్లేట్‌లెట్ రికవరీతో పరస్పర సంబంధం లేదు. యూరోపియన్ బ్లడ్ అండ్ మ్యారో ట్రాన్స్‌ప్లాంటేషన్ గ్రూప్ (EBMT)లో అంతర్జాతీయ సహకారంతో ఎన్‌గ్రాఫ్ట్‌మెంట్ వైఫల్యంతో బాధపడుతున్న రోగుల సమూహంలో అంచనా విలువ యొక్క భవిష్యత్తు అధ్యయనాలు మూల్యాంకనం చేయాలి.