జర్నల్ ఆఫ్ మైక్రోబియల్ & బయోకెమికల్ టెక్నాలజీ

నైరూప్య

కిణ్వ ప్రక్రియలో బాసిల్లస్ సబ్టిలిస్ NRRL 41270 ద్వారా ఉత్పత్తి చేయబడిన ఎక్స్‌ట్రాసెల్యులర్ తక్కువ మాలిక్యులర్ వెయిట్ ఎస్టేరేస్ యొక్క శుద్ధీకరణ, అమైనో యాసిడ్ సీక్వెన్సింగ్ మరియు థర్మోస్టబిలిటీ

పాపగియాని M మరియు పాపామిచెల్ EM

బాసిల్లస్ సబ్‌టిలిస్ NRRL 41270 కిణ్వ ప్రక్రియ బ్రోత్‌లలో ఎక్స్‌ట్రాసెల్యులర్ ఎస్టేరేస్ యాక్టివిటీ 10 kDa కంటే తక్కువ పరమాణు బరువుతో ఒక చిన్న ప్రోటీన్‌లో ఉన్నట్లు కనుగొనబడింది. శుద్దీకరణ తరువాత, ఫ్లోరోసెసిన్ డైబ్యూట్రేట్‌పై ఎస్టేరేస్ చర్య 12 U/min/mg ప్రోటీన్‌లుగా అంచనా వేయబడింది. ఎంజైమ్ సంతృప్తత 5 μM సబ్‌స్ట్రేట్ ఏకాగ్రత వద్ద గమనించబడింది. ఉత్పత్తి చేయబడిన ఎస్టేరేస్ హైడ్రోలైజ్డ్ ట్రిబ్యూటిరిన్. దీని నిర్దిష్ట కార్యాచరణ 17.8 μmol ఆమ్లం విడుదల/నిమి/mg ప్రోటీన్‌లుగా అంచనా వేయబడింది. చిన్న ప్రోటీన్ సైజ్ ఎక్స్‌క్లూజన్ క్రోమాటోగ్రఫీ, SDS-PAGE మరియు అమైనో యాసిడ్ సీక్వెన్సింగ్‌కు లోబడి ఉంది. విశ్లేషణ క్రింది అమైనో ఆమ్ల అవశేషాల క్రమాన్ని వెల్లడించింది: eevaetysfyhitphdystshispapvqffspap, దీని ప్రకారం అణువులో 34 అమైనో ఆమ్ల అవశేషాలు మరియు 3853 యొక్క లెక్కించబడిన పరమాణు ద్రవ్యరాశి, ఇది జెల్ వడపోత మరియు SDS-PAGE ఫలితాలకు అనుగుణంగా ఉంటుంది. సీక్వెన్స్ ఆధారిత విశ్లేషణ మరియు బయోఇన్ఫర్మేటిక్స్ సాధనాల ఉపయోగం తెలిసిన ప్రోటీన్‌లతో గణనీయమైన సారూప్యతను చూపించలేదు, అయితే బలమైన హైడ్రోఫోబిక్ అణువును బహిర్గతం చేసింది, N- టెర్మినల్‌లో α-హెలికల్ కన్ఫర్మేషన్‌తో, మిగిలిన అణువు β-షీట్-రిచ్‌గా ఉంది. ఎంజైమ్ 60 ° C వద్ద 120 h పొదిగే తర్వాత నిర్వహించబడే అసలు కార్యాచరణలో 85% కంటే ఎక్కువ థర్మోస్టేబుల్‌గా కనిపించింది. ఉత్పాదక జీవి మరియు సూక్ష్మ ఎంజైమ్ యొక్క లక్షణాలు, దాని స్థిరత్వం మరియు ఉత్పత్తి లక్షణాల పరంగా మరింత పరిశోధన చేయవలసిన బయోటెక్నాలజికల్‌గా ఆసక్తికరమైన బయోక్యాటలిస్ట్‌ను సూచిస్తాయి.