ఫార్మాస్యూటికా అనలిటికా ఆక్టా

నైరూప్య

అమ్మోనియా-అడక్ట్ ఉపయోగించి ఎలుక మెదడు మోనోఅసిల్‌గ్లిసరాల్ లిపేస్ యాక్టివిటీని ప్రొఫైలింగ్ చేయడం మెరుగుపరిచిన ఎంపిక చేసిన అయాన్ మానిటరింగ్ లిక్విడ్-క్రోమాటోగ్రఫీ పాజిటివ్ ఎలక్ట్రోస్ప్రే అయోనైజేషన్ మాస్ స్పెక్ట్రోమెట్రీ అస్సే

గ్యారీ W కాల్డ్‌వెల్ మరియు వెన్‌షెంగ్ లాంగ్

2-Arachidonoylglycerols (2-AG) అనేది కేంద్ర నాడీ వ్యవస్థలోని ప్రధాన ఎండోకన్నబినాయిడ్స్‌లో ఒకటి. మెదడు మోనోఅసిల్‌గ్లిసరాల్ లిపేస్ (MAGL) చర్య యొక్క ఎంపిక నిరోధం ద్వారా సెంట్రల్ ఎండోకన్నబినాయిడ్స్ సిగ్నలింగ్‌ను నియంత్రించడం అనేది నొప్పి, ఊబకాయం మరియు మధుమేహం మాడ్యులేషన్‌లో కొన్నింటిని పేర్కొనడానికి సంభావ్య చికిత్సా విధానం. అందువల్ల, MAGL ఇన్హిబిటర్ల ఆవిష్కరణకు మెదడులోని ఎండోకన్నబినాయిడ్ స్థాయిలను నిర్ణయించడానికి సున్నితమైన మరియు నమ్మదగిన విశ్లేషణాత్మక పద్ధతి అవసరం. లిక్విడ్ క్రోమాటోగ్రఫీ పాజిటివ్ ఎలక్ట్రోస్ప్రే అయనీకరణ మాస్ స్పెక్ట్రోమెట్రీ (LC / +ESI / MS) మరియు టెన్డం MS ఉపయోగించి మోనోఅసిల్‌గ్లిసరాల్స్ (MAG) స్థాయిల యొక్క ఖచ్చితమైన కొలత, మెదడు ఎండోకన్నబినాయిడ్స్ జీవితంలోని దశలో మాత్రమే ఒత్తిడికి లోనయ్యే అవకాశం లేదు. అధ్యయనం, కానీ పోస్ట్‌మార్టం జీవక్రియ, ఎసిల్ మైగ్రేషన్ (అంటే, మార్పిడికి కూడా అవకాశం ఉంది 2-MAG నుండి 1(3)-MAG వరకు), మెటల్ అడక్ట్ అయాన్ నిర్మాణం మరియు రసాయన జలవిశ్లేషణ లక్ష్య ఎంజైమ్ ద్వారా అదే ఉత్పత్తులను ఉత్పత్తి చేస్తుంది. ఈ కళాఖండాలను నివారించడానికి, ఎంచుకున్న అయాన్ మానిటరింగ్ మోడ్ (SIM)లో ప్రధాన MAGల అమ్మోనియం-అడక్ట్ కాటయాన్‌లను నేరుగా గుర్తించడం కోసం మేము సరళమైన LC / +ESI / MS పద్ధతిని అభివృద్ధి చేసాము. ఇన్ విట్రో MAGL ఇన్హిబిషన్ అస్సే కోసం, ఎలుక మెదడు సజాతీయతతో 37oC ఇంక్యుబేషన్ సమయంలో ఉత్పత్తి చేయబడిన MAGలు మరియు వాటి ఎసిల్ మైగ్రేషన్ ఐసోమర్‌ల యొక్క బేస్‌లైన్ విభజన కోసం LC ఐసోక్రటిక్ ఎలుషన్ ఉపయోగించబడింది. ఇన్-వివో అధ్యయనాల కోసం పోస్ట్‌మార్టం జీవక్రియ మరియు MAGల ఐసోమెరైజేషన్‌ను తగ్గించడానికి, ఎలుక మెదడు ప్రతి గ్రాము మెదడు కణజాలానికి నాలుగు మిల్లీలీటర్ల ఇథనాల్‌లో నేరుగా సజాతీయంగా మార్చబడింది మరియు విస్తృత ఎండోకన్నబినాయిడ్ ప్రొఫైలింగ్ కోసం సరళ LC గ్రేడియంట్ ఎల్యూషన్ వర్తించబడింది. SIM LC / +ESI / MS పద్ధతి MAGL మరియు ఫ్యాటీ యాసిడ్ అమైడ్ హైడ్రోలేస్ (FAAH) ఇన్హిబిటర్ల యొక్క ఇన్-విట్రో మెదడు మూల్యాంకనం యొక్క నిరోధక శక్తిని అంచనా వేయడానికి మరియు లక్ష్య నిశ్చితార్థ అధ్యయనాల కోసం ఇన్-వివో మెదడు అంచనా కోసం ఉపయోగకరంగా ఉన్నట్లు చూపబడింది.