మెర్వాట్ మోర్సీ అబ్బాస్ అహ్మద్, నాగే అబో దహబ్ ఎఫ్, తాహెర్ తహా ఎమ్ మరియు ఫరీద్ హసన్ ఎస్.ఎమ్.
సముద్రపు మృదువైన స్పాంజ్ అప్లిసినా ఫిస్టులారిస్ నుండి కోలుకున్న అన్ని ఎండోఫైటిక్ శిలీంధ్రాలలో, 72.2% L-ఆస్పరాగినేస్ను ఉత్పత్తి చేయగలిగాయి. పొందిన అన్ని ఐసోలేట్లలో, Aspergillus sp. ALAA-2000, సంగ్రహణ ప్రక్రియ యొక్క ఆప్టిమైజేషన్ కోసం వివిధ వ్యవసాయ వ్యర్థాల యొక్క సబ్మెర్జ్డ్ కిణ్వ ప్రక్రియ (SMF) మరియు సాలిడ్ స్టేట్ కిణ్వ ప్రక్రియ (SSF) కింద యాంటీకాన్సర్ ఏజెంట్, L-ఆస్పరాగినేస్ కోసం హైపర్యాక్టివ్ ప్రొడ్యూసర్ ఎంపిక చేయబడింది; ఫిజికోకెమికల్ పారామితుల యొక్క ఆప్టిమైజేషన్, ఇది SSFలో L-ఆస్పరాగినేస్ల ఉత్పత్తిని ప్రభావితం చేస్తుంది మరియు శుద్ధి చేయబడిన L-ఆస్పరాగినేసెస్ పారామితుల యొక్క ఆప్టిమైజేషన్. SSF కింద 30 నిమిషాలకు 40 °C మరియు 150 rpm వద్ద వేడి నీటితో సోయాబీన్ నుండి గరిష్ట L-ఆస్పరాగినేస్ చర్య 23.34 U/ml మరియు గ్లూకోజ్ను కార్బన్ మూలంగా మరియు ఆస్పరాజైన్ని నత్రజని మూలంగా ఉపయోగించి నీటిలో మునిగిన కిణ్వ ప్రక్రియలో 30.64 U/ml తిరిగి పొందబడింది. రెండు రకాల L-ఆస్పరాగినేస్ (AYA-1 మరియు AYA-2) Aspergillus sp యొక్క కల్చర్ సూపర్నాటెంట్ నుండి శుద్ధి చేయబడింది. ALAA-2000 అమ్మోనియం సల్ఫేట్ అవపాతం మరియు జెల్ ఫిల్ట్రేషన్ క్రోమాటోగ్రఫీ (సెఫాడెక్స్ G-200) ద్వారా. ఎంజైమ్ల పరమాణు బరువులు 25 kDa (AYA-1) మరియు 31 kDa (AYA-2). శుద్ధి చేయబడిన L-ఆస్పరాగినేస్ యొక్క పారామితులు AYA-1 (pH 6.0, 60 నిమిషాలకు 30°C నుండి 50°C వద్ద స్థిరంగా ఉంటుంది, ప్రతిచర్య సమయం 15 నిమిషాలు, మరియు సబ్స్ట్రేట్ ఏకాగ్రత 1.275 mg/ml) మరియు AYA-2 ఎంజైమ్ (pH) కోసం ఆప్టిమైజ్ చేయబడ్డాయి. 10, 60కి 30°C నుండి 70°C వరకు స్థిరంగా ఉంటుంది నిమి, ప్రతిచర్య సమయం 15 నిమిషాలు, మరియు సబ్స్ట్రేట్ ఏకాగ్రత 1.275 mg/ml). మెటాలోప్రొటీసెస్ యొక్క నిరోధకాలు, చెలాటింగ్ ఏజెంట్లు EDTA, L-ఆస్పరాగినేస్పై ప్రభావం చూపలేదు. L-ఆస్పరాగినేస్ మెటాలోప్రొటీసెస్ కాదని ఈ పరిశోధనలు సూచిస్తున్నాయి.