జర్నల్ ఆఫ్ స్టెమ్ సెల్ రీసెర్చ్ & థెరపీ

నైరూప్య

మానవ కొవ్వు-ఉత్పన్నమైన స్ట్రోమల్/స్టెమ్ సెల్స్ యొక్క ముందస్తు షరతులు: వాటి పునరుత్పత్తి సామర్థ్యాన్ని మెరుగుపరచడానికి స్వల్పకాలిక ప్రీఇన్‌క్యుబేషన్ రెజిమెన్‌ల మూల్యాంకనం

పాట్రిక్ సి బేర్, జుర్గెన్ ఎమ్ ఓవరాత్, అంజా ఉర్బ్స్చాట్, రాల్ఫ్ షుబెర్ట్ మరియు హెల్ముట్ గీగర్

లక్ష్యం: అవయవ వైఫల్యం మరియు కణజాల గాయం తర్వాత పునరుత్పత్తికి మద్దతు ఇవ్వడానికి స్టెమ్ సెల్-ఆధారిత చికిత్స ఒక మంచి ఎంపిక. MSCల మార్పిడికి గరిష్ట పునరుత్పత్తి సామర్థ్యం కలిగిన కణాలు అవసరం. అందువల్ల, MSCల పునరుత్పత్తి కారకాల విడుదలను మెరుగుపరచడానికి కొత్త వ్యూహాలపై పరిశోధన తక్షణం అవసరం.

పద్ధతులు: హ్యూమన్ అడిపోస్-డెరైవ్డ్ స్ట్రోమల్/స్టెమ్ సెల్స్ (ASC) లిపోఆస్పిరేట్స్ నుండి వేరుచేయబడి, వర్గీకరించబడ్డాయి మరియు కల్చర్ చేయబడ్డాయి. కణాలు ప్రామాణిక పరిస్థితులలో కల్చర్ చేయబడ్డాయి లేదా హైపోక్సిక్ వాతావరణంలో (0.5% O2) లేదా నార్మోక్సియాలో రీకాంబినెంట్ హ్యూమన్ ట్యూమర్ నెక్రోసిస్ ఫ్యాక్టర్-α (TNFα) లేదా రీకాంబినెంట్ హ్యూమన్ ఎపిడెర్మల్ గ్రోత్ ఫ్యాక్టర్ (EGF) సమక్షంలో 48 గంటల పాటు ఇంక్యుబేషన్ ద్వారా ముందస్తుగా కల్చర్ చేయబడ్డాయి. మొదట, qPCR విశ్లేషణ ద్వారా ఎంచుకున్న ఏడు పునరుత్పత్తి ప్రోత్సహించే కారకాలు మూల్యాంకనం చేయబడ్డాయి. 507 ప్రోటీన్ల కోసం వాణిజ్యపరంగా లభించే ప్రోటీన్ శ్రేణిని ఉపయోగించి ASC ల రహస్యం అంచనా వేయబడింది.

ఫలితాలు: PCR విశ్లేషణ మూడు ముందస్తు చికిత్సల ద్వారా ASCల జన్యు వ్యక్తీకరణ యొక్క అవకలన ప్రేరణను చూపించింది. హైపోక్సియాలోని ASCలు VEGF, FGF-7 మరియు IGF-II యొక్క ముఖ్యమైన mRNA ఇండక్షన్‌ను చూపించగా, ఇతర ముందస్తు చికిత్సలు VEGF వ్యక్తీకరణలో గణనీయమైన మార్పును ప్రేరేపించలేదు. HB-EGF మరియు M-CSF యొక్క జన్యు వ్యక్తీకరణ హైపోక్సియాలో మరియు TNFαతో పొదిగించడం ద్వారా గణనీయంగా ప్రేరేపించబడింది, కానీ EGF కాదు. యాంజియోపోయిటిన్-వంటి 1 mRNA మూడు ముందస్తు షరతుల ద్వారా గణనీయంగా ప్రేరేపించబడలేదు. ప్రోటీన్ శ్రేణి ద్వారా మూల్యాంకనం ప్రకారం, పరిశోధించిన 507 ప్రోటీన్ల నుండి 21.9% హైపోక్సియాలో (507 ప్రోటీన్లలో 111) పొదిగిన తర్వాత ఐదు రెట్లు ఎక్కువ పెరిగినట్లు కనుగొనబడింది. EGFతో ప్రీఇన్‌క్యుబేషన్ ఫలితంగా 32.3% (164/507) నియంత్రణకు దారితీసింది, అయితే TNFα మూల్యాంకనం చేయబడిన మొత్తం ప్రోటీన్‌లలో 28.8% అధికం చేసింది (146/507).

తీర్మానం: మూడు ముందస్తు షరతులతో కూడిన నియమాలు అనేక రకాల ప్రోటీన్‌లను ప్రేరేపించాయని పరిశోధనలు సూచిస్తున్నాయి. అయినప్పటికీ, EGFతో స్వల్పకాలిక ప్రీ-ట్రీట్‌మెంట్ అత్యధిక మొత్తంలో ప్రోటీన్‌లను ప్రేరేపించింది మరియు అందువల్ల, కణ చికిత్సా విధానాలకు ఉత్తమమైన ముందస్తు షరతులతో కూడిన పాలనగా కనిపిస్తుంది.