జర్నల్ ఆఫ్ మైక్రోబియల్ & బయోకెమికల్ టెక్నాలజీ

నైరూప్య

థర్మోఫిలిక్ ఫంగస్ నుండి చిటినేస్ జన్యువు యొక్క అతిగా ప్రసరణ , థర్మోమైసెస్ లానుగినోసస్ ఇన్ సాక్రోరోమైసెస్ సెరెవిసియా మరియు రీకాంబినెంట్ చిటినేస్ యొక్క లక్షణం

M. ప్రసాద్ మరియు P. పళనివేలు

థర్మోఫిలిక్ ఫంగస్ నుండి వచ్చిన చిటినేస్ జన్యువు, థర్మోమైసెస్ లానుగినోసస్ ATCC 44008 క్లోన్ చేయబడింది మరియు Saccharomyces cerevisiae SEY 2101లో అతిగా ఒత్తిడి చేయబడింది. రీకాంబినెంట్ చిటినేస్ కరిగే స్రవించే ప్రోటీన్‌గా ఉత్పత్తి చేయబడింది. ఇండక్షన్ మాధ్యమంలో 30 ° C వద్ద నాల్గవ రోజున ఎంజైమ్ కార్యకలాపాలు గరిష్టంగా ఉన్నట్లు కనుగొనబడింది. అతిగా నొక్కిన చిటినేస్ pH 6.5 మరియు 60°C వద్ద వాంఛనీయ కార్యాచరణను ప్రదర్శించింది. రీకాంబినెంట్ చిటినేస్ 50°C వద్ద 6 గంటల తర్వాత 60% కంటే ఎక్కువ ఎంజైమ్ కార్యకలాపాలను పట్టుకోవడం ద్వారా విశేషమైన థర్మోస్టబిలిటీని ఆపాదించింది. SDS-PAGE ద్వారా కొలవబడినట్లుగా అతిగా ఒత్తిడి చేయబడిన చిటినేస్ యొక్క పరమాణు ద్రవ్యరాశి 42 kDa. ఎంజైమ్ యొక్క KM మరియు Vmax వంటి గతి పారామితులు వరుసగా 0.403 mM మరియు 8.74 mmoles/min/mg ప్రోటీన్‌లుగా గుర్తించబడ్డాయి. రీకాంబినెంట్ చిటినేస్ యొక్క సంశ్లేషణ గ్లూకోజ్ ద్వారా బలంగా అణచివేయబడింది. యూకారియోటిక్ ట్రాన్స్‌లేషన్ ఇన్హిబిటర్, ఇండక్షన్ మాధ్యమంలోని సైక్లోహెక్సిమైడ్ 10% అధిక కార్యాచరణను చూపించింది, అయితే 30% కార్యాచరణ ట్రాన్స్‌క్రిప్షనల్ ఇన్హిబిటర్స్ ద్వారా నిరోధించబడింది, అనగా. 8-అజాగ్వానైన్ మరియు 8-హైడ్రాక్సీక్వినోలిన్. అతిగా ఒత్తిడి చేయబడిన రీకాంబినెంట్ చిటినేస్ చిటూలిగోసాకరైడ్‌లను తయారు చేయడానికి ఔషధ పరిశ్రమలో సంభావ్య అప్లికేషన్‌ను కనుగొనవచ్చు.