జర్నల్ ఆఫ్ కోస్టల్ జోన్ మేనేజ్‌మెంట్

నైరూప్య

అన్కల్చర్డ్ మెరైన్ మైక్రోఆర్గానిజమ్స్ నుండి బయోక్యాటలిస్ట్‌ల ఆవిష్కరణ మరియు ఇంజనీరింగ్ కోసం నవల మాలిక్యులర్ మెథడ్స్

అగస్టినస్ రాబర్ట్ ఉరియా, యుస్రో నూరి ఫౌజ్యా మరియు ఎకోవతి చసానా

మెటాజెనోమిక్స్ అనేది ఒక శక్తివంతమైన సాగు-స్వతంత్ర విధానం, ఇది సంస్కృతి లేని సముద్ర సూక్ష్మజీవుల నుండి బయోక్యాటలిస్ట్‌లను యాక్సెస్ చేయడానికి అన్వయించవచ్చు . ఈ విధానం ద్వారా సముద్ర జీవ ఉత్ప్రేరకాల ఆవిష్కరణ,
సాధారణంగా, నాలుగు ప్రధాన దశలను కలిగి ఉంటుంది. మొదట, జీవ ఉత్ప్రేరకం-ఎన్‌కోడింగ్ జన్యువుల సమూహాన్ని కలిగి ఉన్న మెటాజెనోమిక్ లైబ్రరీ సముద్ర పర్యావరణం నుండి నిర్మించబడింది, ఇది ఎంజైమ్‌గా-జీర్ణమైన DNA, అన్‌కట్ DNA మరియు PCR-యాంప్లిఫైడ్ ఉత్పత్తులను
క్లోనింగ్ చేయడంతో సహా వివిధ పద్ధతుల ద్వారా చేయవచ్చు . రెండవది, సిటు హైబ్రిడైజేషన్ లేదా పాలిమరేస్ చైన్ రియాక్షన్ (PCR) లో వ్యక్తీకరణ ఉత్పత్తి యొక్క కార్యాచరణ పరీక్షను ఉపయోగించడం ద్వారా
మెటాజెనోమిక్ లైబ్రరీ ఆసక్తి ఉన్న జన్యువుల కోసం పరీక్షించబడుతుంది. మూడవది, పొందబడిన లక్ష్య జన్యువులు, ఫంక్షనల్ మరియు ఫైలోజెనెటిక్ జన్యువులు రెండూ, ఎన్‌కోడ్ చేయబడిన బయోకెటలిస్ట్‌ల యొక్క క్రియాత్మక మరియు నిర్మాణాత్మక లక్షణాలతో పాటు సూక్ష్మజీవుల మూలాలపై సమాచారాన్ని పొందడానికి బయోఇన్ఫర్మేటిక్ సాధనాలను ఉపయోగించడం ద్వారా క్రమం మరియు విశ్లేషించబడతాయి . చివరగా, లక్ష్య జన్యువులు తగిన సూక్ష్మజీవుల హోస్ట్‌లలో వ్యక్తీకరించబడతాయి, తద్వారా సంబంధిత రీకాంబినెంట్ బయోకెటలిస్ట్‌లను ఉత్పత్తి చేస్తుంది. పనితీరు మెరుగుదల కోసం మెరైన్ బయోకెటలిస్ట్‌ల ఇంజనీరింగ్‌లో ఇప్పటికే ఉన్న అన్ని పద్ధతులను రెండు ప్రధాన వ్యూహాలుగా వర్గీకరించవచ్చు : (i) హేతుబద్ధమైన రూపకల్పన మరియు (ii) దర్శకత్వం వహించిన పరిణామం. హేతుబద్ధమైన డిజైన్, పరిమితి ఎంజైమ్(ల) ఉపయోగం మరియు అతివ్యాప్తి పొడిగింపు (SOE) ద్వారా స్ప్లికింగ్‌ను కలిగి ఉండవచ్చు , నిర్దిష్ట అమైనో ఆమ్లం(ల)ను మార్చడానికి బయోక్యాటలిస్ట్ యొక్క నిర్మాణ మరియు క్రియాత్మక లక్షణాలపై సమాచారం అవసరం . లోపం సంభవించే PCR సాంకేతికత మరియు జన్యు మార్పిడితో సహా నిర్దేశిత పరిణామానికి అటువంటి సమాచారం అవసరం లేదు