జర్నల్ ఆఫ్ స్టెమ్ సెల్ రీసెర్చ్ & థెరపీ

నైరూప్య

వయోజన ఎలుకల ఫైబ్రోబ్లాస్ట్‌ల నుండి ఫ్రీ-వైరల్ రీప్రోగ్రామ్ చేయబడిన స్టెమ్ సెల్-డెరైవ్డ్ డోపమినెర్జిక్ న్యూరాన్‌ల కోసం సంభావ్య క్యాన్సర్ ప్రమాదాన్ని గుర్తించడం లేదు

లియు జి

లక్ష్యం: సోమాటిక్ కణాల పునరుత్పత్తి ద్వారా స్టెమ్ సెల్ రీప్లేస్‌మెంట్ థెరపీ అనేది న్యూరోడెజెనరేటివ్ వ్యాధులు మరియు వ్యక్తిగతీకరించిన ఔషధాలకు ముఖ్యమైన భావి చికిత్స. వైరస్-వాహక రీప్రోగ్రామింగ్ జన్యువులు కణితి ఏర్పడటానికి గణనీయమైన ప్రమాదాన్ని అందిస్తాయి కాబట్టి, ప్రస్తుత విధానాలు వైరల్ నమూనాను నాన్-వైరల్ సిస్టమ్‌తో భర్తీ చేస్తాయి. అయినప్పటికీ, ఈ పునరుత్పత్తి జన్యువుల యొక్క ఆంకోజెనిక్ లక్షణాల గురించి ఇప్పటికీ చాలా ఆందోళన ఉంది. రీప్రొగ్రామింగ్ తర్వాత తుది ఉత్పత్తులలో జన్యుసంబంధమైన DNA ఏకీకరణ మరియు ఉత్పరివర్తన సంఘటనలను నాన్-వైరల్ సిస్టమ్‌లు ప్రభావితం చేయవని ప్రస్తుతం ప్రత్యక్ష ఆధారాలు ఏవీ ధృవీకరించలేదు.
పద్ధతులు: నాలుగు రీప్రొగ్రామింగ్ జన్యువులను కలిగి ఉన్న ప్రత్యేకమైన నాన్-వైరల్ వెక్టర్‌ని ఉపయోగించి రీప్రోగ్రామ్ చేసిన స్టెమ్ సెల్-డెరైవ్డ్ డోపామినెర్జిక్ న్యూరాన్‌ల సంభావ్య క్యాన్సర్ ప్రమాదాన్ని మేము విశ్లేషించాము. వయోజన ఎలుకల ఫైబ్రోబ్లాస్ట్‌ల నుండి 50 రోజుల సెల్ కల్చర్ తర్వాత రీప్రోగ్రామ్ చేయబడిన స్టెమ్ సెల్-డెరైవ్డ్ డోపామినెర్జిక్ న్యూరాన్‌లు తుది ఉత్పత్తులు. 6 నెలల సంస్కృతి తర్వాత, ఈ కణాలు క్యాన్సర్ ప్రమాదం కోసం అంచనా వేయబడ్డాయి.
ఫలితాలు: మొత్తం క్యాన్సర్ ప్రమాద అంచనాలను మొదట బహుళ స్టెమ్ సెల్ బయోమార్కర్లను ఉపయోగించి పరిశీలించారు. ఈ బయోమార్కర్ల యొక్క అతిగా ఎక్స్‌ప్రెషన్‌ను మేము గుర్తించలేదు. అంతేకాకుండా, మాస్ సెల్ కల్చర్‌లో 6 నెలల తర్వాత అత్యంత ముఖ్యమైన న్యూరోట్రాన్స్‌మిషన్ కారకాలు వ్యక్తీకరించబడ్డాయా లేదా అని మేము అంచనా వేసాము. డోపమైన్ సంశ్లేషణలో రేటు-పరిమితం చేసే ఎంజైమ్‌గా టైరోసిన్ హైడ్రాక్సిలేస్ (TH) యొక్క బలమైన జన్యు వ్యక్తీకరణ మాత్రమే కనుగొనబడిందని మా ఫలితాలు నిర్ధారించాయి. ఇంకా, TH-పాజిటివ్ డోపమినెర్జిక్ న్యూరాన్‌ల యొక్క తుది ఉత్పత్తి TH జన్యుసంబంధమైన DNAని క్రమం చేయడం ద్వారా నిర్ధారించబడింది. నాలుగు రిప్రొగ్రామింగ్ జన్యువులలో ఏదీ హోస్ట్ సెల్ యొక్క జన్యుసంబంధమైన DNAలో విలీనం చేయబడలేదని మరియు TH జన్యుసంబంధమైన DNA సంబంధిత పూర్తి 13 కోడింగ్ ఎక్సోన్‌లను రెండు-ముగింపు పాక్షిక అనువదించని ప్రాంతాలతో జీన్ సీక్వెన్సింగ్ తర్వాత ఇతర ఉత్పరివర్తన సంఘటనలు జరగలేదని మా డేటా సూచించింది.
ముగింపు: రీ-ప్రోగ్రామ్ చేయబడిన అడల్ట్ మౌస్ ఫైబ్రోబ్లాస్ట్‌లు-ఉత్పన్నమైన డోపమినెర్జిక్ న్యూరాన్‌లు సురక్షితమైన సాంకేతికత మరియు న్యూరోడెజెనరేటివ్ వ్యాధులకు సంభావ్య చికిత్సగా నిరూపించబడ్డాయి.