వంశపారంపర్య జన్యుశాస్త్రం: ప్రస్తుత పరిశోధన

నైరూప్య

Cngb3 నాకౌట్ మైస్‌లో తగ్గిన వెక్టర్ వాల్యూమ్‌తో AAV-మెడియేటెడ్ జీన్ థెరపీ యొక్క మూల్యాంకనం, అక్రోమాటోప్సియా యొక్క నమూనా

లియు ఎక్స్, జాంగ్ వై, డు డబ్ల్యూ, షి డబ్ల్యూ, టావో వై, డెంగ్ డబ్ల్యూ, లి జె, జావో సి, పాంగ్ జె

ఉద్దేశ్యం: ఈ అధ్యయనం సబ్‌ట్రెటినల్ ఇంజెక్షన్ కోసం ఉపయోగించే వెక్టర్ వాల్యూమ్‌ను C57bl/6J మౌస్ మొత్తం రెటీనాను బదిలీ చేయడానికి తగ్గించవచ్చా మరియు Cngb3 నాకౌట్ (KO) మౌస్ మోడల్‌లో కోన్ పనితీరును పునరుద్ధరించగలదా అని పరిశోధించడానికి రూపొందించబడింది.
పద్ధతులు: C57bl/6J ఎలుకలు మరియు Cngb3 KO ఎలుకలు వరుసగా 0.5 μL లేదా 1 μL AAV5-smCBAmCherry వెక్టర్ మరియు AAV5-IRBP/GNAT2-hCngb3 వెక్టర్ యొక్క సబ్‌ట్రెటినల్ ఇంజెక్షన్‌ను అందుకున్నాయి. బదిలీ చేయబడిన ప్రాంతాన్ని అంచనా వేయడానికి వైల్డ్-టైప్ మౌస్ కళ్ళ నుండి రెటీనా మొత్తం మౌంట్‌లు మరియు స్తంభింపచేసిన విభాగాలు తయారు చేయబడ్డాయి. Cngb3 KO ఎలుకల దృష్టిలో వెక్టర్ ఇంజెక్షన్ చేసిన రెండు నెలల తర్వాత డార్క్ మరియు లైట్-అడాప్టెడ్ ఎలక్ట్రోరెటినోగ్రామ్‌లు (ERG లు) రికార్డ్ చేయబడ్డాయి.
ఫలితం: AAV5-smCBA-mCherry ఇంజెక్ట్ చేసిన అడవి-రకం ఎలుకల రెటీనాలో, ఇంజెక్షన్ వాల్యూమ్‌ల మధ్య తేడా కనిపించలేదు. mCherry పాజిటివ్ రెటీనా పిగ్మెంట్ ఎపిథీలియల్ (RPE) మరియు ఫోటోరిసెప్టర్ కణాలు మొత్తం రెటీనా అంతటా గమనించబడ్డాయి. AAV5-IRBP/GNAT2-hCngb3- ఇంజెక్ట్ చేయబడిన Cngb3 KO ఎలుకలలో, 1-μL- ఇంజెక్ట్ చేయబడిన ఎలుకలు 0.5-μL- ఇంజెక్ట్ చేయబడిన ఎలుకల కంటే ఫోటోపిక్ ERG పునరుద్ధరణ యొక్క అధిక సగటును చూపించాయి. అయినప్పటికీ, 1-μL- ఇంజెక్ట్ చేయబడిన ఎలుకలలో స్కోటోపిక్ ERG లు తక్కువగా ఉన్నాయి, అధిక ఇంజెక్షన్ వాల్యూమ్‌లు ఎక్కువ నష్టాలకు దారితీస్తాయని సూచిస్తున్నాయి.
ముగింపు: వెక్టార్ యొక్క తగ్గిన వాల్యూమ్ (0.5 μL) తక్కువ నష్టాలను ప్రేరేపించింది. అయినప్పటికీ, అధిక మోతాదులో వెక్టర్ (1 μL) Cngb3 KO మౌస్‌లో అధిక ERG ఫంక్షన్‌ను పునరుద్ధరిస్తుంది.