మిచెల్ డి డి ఒలివేరా, ఆండ్రే ఎస్ డి ఒలివేరా, నినా ఆర్ డ్యూత్రా, రాఫెల్ ఎఫ్‌ఓ ఫ్రాంకా, ఎడ్వర్డో ఆర్ హోండా, ఫెర్నాండో బి జాంచి, క్లోవిస్ ఎ నెవెస్, సింథియా సి డా సిల్వా, బెనెడిటో అల్ డా ఫోన్సెకా మరియు సెర్గియో ఓ డి పౌలా
డెంగ్యూ రీకాంబినెంట్ సబ్యూనిట్ వ్యాక్సిన్‌లను అభివృద్ధి చేయడానికి చేసిన అనేక ప్రయత్నాలు తగినంత స్థాయి వ్యక్తీకరణ మరియు E ప్రోటీన్ యొక్క తప్పు మడత కారణంగా విఫలమయ్యాయి. E ప్రోటీన్ వ్యక్తీకరణ స్థాయికి పూర్వగామి మెమ్బ్రేన్ ప్రోటీన్ యొక్క ప్రాముఖ్యతను ధృవీకరించడానికి, మేము డెంగ్యూ-2 మరియు డెంగ్యూ-3 వైరస్ జాతుల నుండి prM జన్యువు యొక్క పూర్తి-నిడివి క్రమాన్ని క్లోనింగ్ చేయడం ద్వారా రెండు రీకాంబినెంట్ ప్లాస్మిడ్‌లను నిర్మించాము. డెంగ్యూ-2 వైరస్ యొక్క E ప్రోటీన్ యొక్క కత్తిరించబడిన సంస్కరణను వ్యక్తీకరిస్తుంది. తరువాత, విట్రోలో E ప్రోటీన్ వ్యక్తీకరణ స్థాయిలపై వాటి ప్రభావం కోసం మేము ఈ రెండు నిర్మాణాలను విశ్లేషించాము. పరోక్ష ఇమ్యునోఫ్లోరోసెన్స్ మరియు ఇమ్యునోబ్లోటింగ్ ద్వారా ప్రదర్శించబడిన విధంగా బదిలీ చేయబడిన వెరో కణాలలో E ప్రోటీన్ వ్యక్తీకరణ కనుగొనబడినందున రెండు ప్లాస్మిడ్‌లు E ప్రోటీన్ యొక్క సరైన వ్యక్తీకరణను అందించాయని మా ఫలితాలు చూపించాయి. సెల్ ఎక్స్‌ట్రాక్ట్‌ల యొక్క వెస్ట్రన్ బ్లాట్‌ల యొక్క డెన్సిటోమెట్రీ విశ్లేషణ pCID2EtD3prMతో బదిలీ చేయబడిన కణాలలో E ప్రోటీన్ యొక్క 67.02% అధిక వ్యక్తీకరణను చూపించింది, డెంగ్యూ-3 వైరస్ యొక్క prM క్రమం E ప్రోటీన్ యొక్క సరైన ప్రాసెసింగ్‌లో సహాయం చేయడంలో మరింత ప్రభావవంతంగా ఉండవచ్చని సూచిస్తుంది. . ఈ అధ్యయనం యొక్క ఫలితాలు టీకాలలో మరియు రోగనిర్ధారణ ప్రయోజనాల కోసం E ప్రోటీన్ యాంటిజెన్ యొక్క ఇన్ విట్రో ఉత్పత్తిని పెంచడానికి ఉపయోగించవచ్చు.