జీన్ టెక్నాలజీ

నైరూప్య

మానవ కణాలలో యాదృచ్ఛిక ఏకీకరణకు దారితీసే యాదృచ్ఛిక DNA దెబ్బతినడానికి కారణమైన ఎండోజెనస్ కారకాలు

హరునా కమెకావా, అయా కురోసావా, మసుమి ఉమెహరా, ఎరికో టయోడా మరియు నోరిటకా అడాచి

యాదృచ్ఛిక ఏకీకరణ అనేది ఒక దృగ్విషయం, దీనిలో బదిలీ చేయబడిన DNA అణువులు నాన్-హోమోలాగస్ రీకాంబినేషన్ ద్వారా హోస్ట్ జన్యువులోకి (యాదృచ్ఛిక సైట్‌లు) కలిసిపోతాయి. DNA డబుల్-స్ట్రాండ్ బ్రేక్‌ల మరమ్మత్తు యాదృచ్ఛిక ఏకీకరణ సంఘటనలకు దారితీస్తుందని భావించినప్పటికీ, జీవ కణాలలో ఈ అంతర్జాత DNA గాయాలు ఎలా ఉత్పన్నమవుతాయో సరిగా అర్థం కాలేదు. ఈ అధ్యయనంలో, యాదృచ్ఛిక ఏకీకరణకు దారితీసే జన్యుసంబంధమైన DNA దెబ్బతినడానికి DNA టోపోయిసోమెరేస్ IIa (Top2α) మరియు రియాక్టివ్ ఆక్సిజన్ జాతులు (ROS) కారణమని మేము సాక్ష్యాలను అందిస్తున్నాము. ప్రత్యేకంగా, సెల్ కల్చర్ సమయంలో సెల్యులార్ టాప్2 ఎక్స్‌ప్రెషన్ స్థాయిలు మరియు ఆక్సిజన్ సాంద్రతల ప్రభావాలను పరిశీలించడానికి మేము మానవ ప్రీ-బి లింఫోసైట్ సెల్ లైన్‌ను ఉపయోగించాము. Top2α siRNAతో కణాలకు చికిత్స చేయడం యాదృచ్ఛిక ఏకీకరణ ఫ్రీక్వెన్సీని గణనీయంగా తగ్గిస్తుందని మేము కనుగొన్నాము, అయితే Top2β లేకపోవడం తక్కువ లేదా ప్రభావం చూపలేదు. సాధారణ (21%) ఆక్సిజన్ పరిస్థితులతో పోలిస్తే ఎలెక్ట్రోపోరేషన్ డిస్‌ప్లే తర్వాత తక్కువ (3%) ఆక్సిజన్ కల్చర్ పరిస్థితులలో నిరంతరం కల్చర్ చేయబడిన కణాలు యాదృచ్ఛిక ఇంటిగ్రేషన్ ఫ్రీక్వెన్సీని తగ్గించాయని కూడా మేము చూపిస్తాము. ఈ పరిశోధనలు మానవ కణాలలో బదిలీ చేయబడిన DNA యొక్క యాదృచ్ఛిక ఏకీకరణకు దారితీసే DNA నష్టాన్ని ఉత్పత్తి చేయగల అంతర్జాత కారకాలు Top2α ప్రోటీన్ మరియు ROS అనే భావనకు మద్దతు ఇస్తుంది.