జర్నల్ ఆఫ్ మైక్రోబియల్ & బయోకెమికల్ టెక్నాలజీ

నైరూప్య

Aspergillus fumigatus L-అమినో యాసిడ్ ఆక్సిడేస్-రెండు దశల శుద్దీకరణ మరియు ఎంజైమ్ యొక్క లక్షణం

సుస్మితా సింగ్, బినోద్ కుమార్ గొగోయ్ మరియు రాజీబ్ లోచన్ బెజ్బరువా

Aspergillus fumigatus నుండి పొందిన L-అమినో యాసిడ్ ఆక్సిడేస్ (L-aao) అయాన్ మార్పిడి మరియు జెల్ ఫిల్ట్రేషన్ క్రోమాటోగ్రఫీల ద్వారా శుద్ధి చేయబడింది. అయాన్-ఎక్స్ఛేంజ్ క్రోమాటోగ్రఫీలో L-aao యొక్క దిగుబడి 24.40 % అయితే జెల్ ఫిల్ట్రేషన్ ద్వారా శుద్ధి చేయబడిన L-aao యొక్క రికవరీ క్రూడ్ ఎంజైమ్‌లో 18.70 %. శుద్ధి చేయబడిన ఎంజైమ్ యొక్క పరమాణు ద్రవ్యరాశి SDS PAGE ద్వారా 55 kDa మరియు జెల్ వడపోత ద్వారా 93 kDaగా అంచనా వేయబడింది. ఎంజైమ్ 40ºC వరకు స్థిరంగా ఉంటుంది మరియు 5.6-9.2 విస్తృత pH పరిధిలో ఉంటుంది. టైరోసిన్ మరియు ఫెనిలాలనైన్ అనే హైడ్రోఫోబిక్ సుగంధ L-అమినో ఆమ్లాల పట్ల ఎంజైమ్ అధిక విశిష్టతను కలిగి ఉంటుంది. గతి పారామితులు, Km మరియు Vmax వరుసగా 43.47 mM మరియు 0.0434 μmol/ min/mLగా నిర్ణయించబడ్డాయి. పది mM బెంజోయిక్ యాసిడ్ మరియు EDTA ఎంజైమ్‌ను పూర్తిగా నిరోధించాయి, అయితే గ్లైసిన్ (29.56%) మరియు α-నాప్‌థాల్ (12.4%)తో కనిష్ట నిరోధం గమనించబడింది. రిబోఫ్లావిన్, సోడియం అజైడ్ మరియు 8-హైడ్రాక్సీక్వినోలిన్ ఎంజైమ్‌ను వరుసగా 44.89%, 49.63% మరియు 70.07% వరకు నిరోధిస్తాయి. 10-4 M మరియు 10-3 M వద్ద MgSO4 ఎంజైమ్ కార్యకలాపాలను వరుసగా 1.72 మరియు 2.22 రెట్లు పెంచింది, అయితే 10-3 M వద్ద CuSO4 కార్యాచరణను 1.65 రెట్లు పెంచింది. ఇది Aspergillus fumigatus నుండి L-aao యొక్క శుద్దీకరణ యొక్క మొదటి నివేదిక.