వంశపారంపర్య జన్యుశాస్త్రం: ప్రస్తుత పరిశోధన

నైరూప్య

మోనోక్లోనల్ యాంటీ-ఓక్రోటాక్సిన్ A యాంటీబాడీ లేదా F(ab')2 ఫ్రాగ్‌మెంట్ ద్వారా ఓక్రాటాక్సిన్ Aని నిర్ణయించడానికి ELISAలు

యావోర్ ఇవనోవ్

వియుక్త
Ochratoxins సాధ్యమయ్యే మానవ క్యాన్సర్ కారకాలు మరియు ఆహారాలలో దాని నిర్ణయానికి సున్నితమైన ఇమ్యునోఅస్సే అభివృద్ధి చాలా ముఖ్యమైన పని. ఓక్రాటాక్సిన్ A (OTA) లేదా దాని F(ab')2 ఫ్రాగ్‌మెంట్‌కు వ్యతిరేకంగా ఎలుకల మోనోక్లోనల్ యాంటీబాడీ (mAb) ఆధారంగా సున్నితమైన ELISAలను అభివృద్ధి చేయడం ఈ అధ్యయనం యొక్క లక్ష్యం. కణజాల-సంస్కృతి పద్ధతులను ఉపయోగించి ఎలుకల mAb విట్రోలో ఉత్పత్తి చేయబడింది. పొందిన యాంటీ-OTA mAb యొక్క కార్యాచరణ కొలవబడింది. ఉత్పత్తి చేయబడిన mAb యొక్క పెప్సిన్ జలవిశ్లేషణ ద్వారా యాంటీ-OTA mAb యొక్క F(abʹ)2 భాగం పొందబడింది. పొందిన F(ab')2 భాగం మరియు వ్యతిరేక OTA mAbని ఉపయోగించడం ద్వారా పరోక్ష ELISAలు ప్రదర్శించబడ్డాయి. పెరాక్సిడేస్-లేబుల్ చేయబడిన సెకండరీ యాంటీబాడీ ఉపయోగించబడింది. F(abʹ)2 భాగంతో పరోక్ష ELISA యొక్క విశ్లేషణాత్మక లక్షణాలు mAbతో పోల్చబడ్డాయి. F(ab')2 ఫ్రాగ్‌మెంట్‌తో ఇమ్యునోఅస్సే వద్ద ఫాస్ఫేట్ బఫర్‌లో OTA యొక్క సరళ పరిధి 0.1 నుండి 100 ng/mL వరకు ఉంటుంది. మొత్తం యాంటీ-OTA mAbతో ఇమ్యునోఅస్సే యొక్క లీనియర్ పరిధి 0.1 నుండి 10 ng/mL వరకు ఉంది. పొందిన ఫలితాలు ochratoxin Aకి వ్యతిరేకంగా ధృవీకరించబడిన ఎలుకల mAb ద్వారా పోల్చబడ్డాయి. ధృవీకరించబడిన mAbతో సరళ పరిధి 1 నుండి 500 ng/mL వరకు ఉంది. పొందిన F(abʹ)2 భాగం లేదా ఉత్పత్తి చేయబడిన యాంటీ-OTA mAbతో అభివృద్ధి చెందిన ELISAలు తక్కువ OTA గాఢతను కొలిచే అవకాశం ఉంది.