జర్నల్ ఆఫ్ స్టెమ్ సెల్ రీసెర్చ్ & థెరపీ

నైరూప్య

TBK1 యొక్క డూప్లికేషన్ నార్మల్ టెన్షన్ గ్లాకోమా ఉన్న రోగి నుండి iPSC-ఉత్పన్నమైన రెటీనా కణాలలో ఆటోఫాగీని ప్రేరేపిస్తుంది

బడ్ ఎ టక్కర్, ఫ్రాన్సిస్ సోలివాన్-టింపే, బెన్ ఆర్ రూస్, క్రిస్టిన్ ఆర్ అన్ఫిన్సన్, అలాన్ ఎల్ రాబిన్, ల్యూక్ ఎ విలే, రాబర్ట్ ఎఫ్ ముల్లిన్స్ మరియు జాన్ హెచ్ ఫింగర్ట్

TBK1 జన్యువు యొక్క డూప్లికేషన్ సాధారణ టెన్షన్ గ్లాకోమా (NTG)కి కారణమవుతుంది; అయితే ఈ కాపీ సంఖ్య వైవిధ్యం రెటీనా గ్యాంగ్లియన్ సెల్ మరణానికి దారితీసే విధానం సరిగా అర్థం కాలేదు. రెటీనా వంటి ప్రాప్యత చేయలేని కణజాలాలలో ఉత్పరివర్తన చెందిన జన్యు ఉత్పత్తి యొక్క పనితీరు లేదా పనిచేయకపోవడాన్ని పరిశోధించడానికి చర్మం-ఉత్పన్నమైన ప్రేరిత ప్లూరిపోటెంట్ మూలకణాలను (iPSC లు) ఉపయోగించగల సామర్థ్యం ఇప్పుడు విట్రోలో వ్యాధి పాథోఫిజియాలజీని ప్రశ్నించే సామర్థ్యాన్ని అందిస్తుంది. ట్రాన్స్‌క్రిప్షన్ కారకాలైన OCT4, SOX2, KLF4 మరియు c-MYC యొక్క వైరల్ ట్రాన్స్‌డక్షన్ ద్వారా TBK1-అనుబంధ NTG ఉన్న రోగి నుండి పొందిన డెర్మల్ ఫైబ్రోబ్లాస్ట్‌ల నుండి iPSCలు ఉత్పత్తి చేయబడ్డాయి. రెటీనా ప్రొజెనిటర్ కణాలు మరియు తదుపరి రెటీనా గ్యాంగ్లియన్ సెల్ లాంటి న్యూరాన్‌లు మా గతంలో అభివృద్ధి చేసిన స్టెప్‌వైస్ డిఫరెన్సియేషన్ ప్రోటోకాల్‌ను ఉపయోగించి ఉత్పన్నమయ్యాయి. TUJ1, MAP2, THY1, NF200, మరియు ATOH7 మరియు ఇమ్యునోహిస్టోకెమిస్ట్రీ NF200 మరియు ATOH7లకు వ్యతిరేకంగా లక్ష్యంగా చేసుకున్న rt-PCR ద్వారా రెటీనా గ్యాంగ్లియన్ లాంటి కణాలకు భేదం ప్రదర్శించబడింది. TBK1 జన్యు డూప్లికేషన్‌తో NTG రోగుల నుండి తీసుకోబడిన ఫైబ్రోబ్లాస్ట్‌లు మరియు రెటీనా గ్యాంగ్లియన్ సెల్ లాంటి న్యూరాన్‌లు రెండూ LC3-II ప్రోటీన్ స్థాయిలను పెంచాయని వెస్ట్రన్ బ్లాట్ విశ్లేషణ నిరూపించింది (ఆటోఫాగికి కీలకమైన మార్కర్). TBK1 యొక్క నకిలీ TBK1 యొక్క వ్యక్తీకరణను పెంచుతుందని గతంలో చూపబడింది మరియు అదే డూప్లికేషన్ LC3-II యొక్క క్రియాశీలతకు దారితీస్తుందని ఇక్కడ మేము ప్రదర్శిస్తాము. TBK1- అనుబంధిత గ్లాకోమా ఈ ఉత్ప్రేరక మార్గం యొక్క క్రమబద్దీకరణ (ఓవర్-యాక్టివేషన్) వల్ల సంభవించవచ్చని ఇది సూచిస్తుంది.