బయోకెమిస్ట్రీ & అనలిటికల్ బయోకెమిస్ట్రీ

నైరూప్య

రామన్ స్పెక్ట్రోస్కోపీతో డబుల్ స్ట్రాండెడ్ DNA నష్టం అంచనా వేయబడింది

ఔనెర్ AW మరియు థామస్ JC

డబుల్ స్ట్రాండెడ్ DNA బ్రేక్‌లు [DSBలు] మరియు తదుపరి మరమ్మత్తు DNA నష్టాన్ని సరిచేయవచ్చు లేదా పొరపాటున కణాల నష్టం మరియు వ్యాధికి దారితీసే ఉత్పరివర్తనాలకు కారణం కావచ్చు. డిఎస్‌బిలను రామన్ స్పెక్ట్రోస్కోపీతో కొలవవచ్చు , శుద్ధి చేయబడిన DNA నమూనాల నుండి విభిన్న పరమాణు వైబ్రేషన్‌ల ఫలితంగా ఏర్పడే అస్థిరమైన చెల్లాచెదురుగా ఉన్న కాంతిని ఉపయోగించి. 20 సెకన్లు మరియు 2 సంచితాల ఎక్స్పోజర్ సమయంతో, రామన్ విశ్లేషణలో వృత్తాకార pBS KS+ ప్లాస్మిడ్ DNA వైబ్రేషన్లు నీటి ఖాళీ నియంత్రణను పోలి ఉన్నాయని కనుగొన్నారు. pBS KS+ సింగిల్ EcoR1 సైట్ యొక్క పరిమితి లీనియర్ DNA మరియు 880, 1044, 1084 మరియు 1458 cm ^-1 వద్ద రామన్ శిఖరాలలో గణనీయమైన పెరుగుదలను సృష్టించింది . DNA నష్టాన్ని రామన్ గుర్తించడాన్ని మరింత అన్వేషించడానికి, మానవ జుర్కాట్ లింఫోసైట్‌లను +/- 16 μg/ml Bleocin™లో పెంచారు. Bleocin ^{™ చికిత్స చేయబడిన కణాల నుండి DNA 880, 1044, 1084, మరియు 1458 cm -1} వర్సెస్ చికిత్స చేయని కణాల వద్ద మెరుగైన రామన్ శోషణను ప్రదర్శించింది . జుర్కాట్ కణాలు ప్రో-అపోప్టోటిక్ బాక్స్ ప్రొటీన్ మరియు p53ని వ్యక్తీకరించే సామర్థ్యంలో లోపాన్ని కలిగి ఉన్నాయి, అయినప్పటికీ బ్లీయోసిన్ ^™ ఎక్స్‌పోజర్ TAp73 స్థాయిలను పెంచింది మరియు తదనంతరం కణాల మరణం. జీవసంబంధ పదార్థాలలో తక్కువ జోక్యం మరియు అధిక సున్నితత్వం కారణంగా, రామన్ స్పెక్ట్రోస్కోపీ అనేది సాపేక్ష DSBల పరిధిని తులనాత్మకంగా అంచనా వేయడానికి వేగవంతమైన మరియు సులభమైన పద్ధతి. జీవించి ఉన్న మరియు చనిపోతున్న కణాల విశ్లేషణ అవసరమయ్యే కామెట్ పరీక్షల వలె కాకుండా, ఏ కణం నుండి అయినా వివిక్త DNA సులభంగా పునరుద్ధరించబడుతుంది, నిల్వ చేయబడుతుంది మరియు DSB విశ్లేషణ తర్వాత చేయబడుతుంది.