జర్నల్ ఆఫ్ స్టెమ్ సెల్ రీసెర్చ్ & థెరపీ

నైరూప్య

Doublecotin-Like Kinase 1 యాంటీ అపోప్టోసిస్ పాత్‌వే ద్వారా కొలొరెక్టల్ క్యాన్సర్ కణాల కెమోరెసిస్టెన్స్‌ని పెంచుతుంది

లియానా లి, కియెర్రా జోన్స్ మరియు హావో మెయి

నేపథ్యం: కొలొరెక్టల్ క్యాన్సర్ (CRC) అనేది మూడవ అత్యంత సాధారణ క్యాన్సర్ నిర్ధారణ మరియు యునైటెడ్ స్టేట్స్‌లో క్యాన్సర్ సంబంధిత మరణాలకు రెండవ ప్రధాన కారణం. CRC పునరావృతం కావడానికి క్యాన్సర్ మూల కణాలు (CSCలు) ప్రాథమిక కారణం అని నమ్ముతారు. నిర్దిష్ట స్టెమ్ సెల్ మార్కర్, డబుల్‌కార్టిన్ లాంటి కినేస్ 1 (DCLK1) CRC యొక్క ట్యూమోరిజెనిసిస్ మరియు పురోగతిలో కీలక పాత్ర పోషిస్తుంది. DCLK1 యొక్క అప్-రెగ్యులేషన్ పేలవమైన రోగ నిరూపణతో పరస్పర సంబంధం కలిగి ఉంది. CRC కణాల మెరుగైన కెమోరెసిస్టెన్స్‌తో DCLK1 పరస్పర సంబంధం కలిగి ఉందో లేదో అస్పష్టంగా ఉంది. CRC కణాల కెమోరెసిస్టెన్స్ మరియు అంతర్లీన పరమాణు విధానాలతో DCLK1 అనుబంధాన్ని బహిర్గతం చేయాలని మేము లక్ష్యంగా పెట్టుకున్నాము.

పద్ధతులు: HCT116 కణాలు (WT) ఉపయోగించి స్థిరమైన DCLK1 ఓవర్-ఎక్స్‌ప్రెషన్ కణాలు (DCLK1+) స్థాపించబడ్డాయి. DCLK1+ మరియు WT కణాలు 5-ఫ్లోరోరాసిల్ (5-Fu)తో 24 లేదా 48 గంటలపాటు వివిధ మోతాదులలో చికిత్స చేయబడ్డాయి. సెల్ ఎబిబిలిటీని అంచనా వేయడానికి MTT పరీక్ష ఉపయోగించబడింది మరియు 5-Fu యొక్క IC50 నిర్ణయించబడింది. కాస్పేస్-3 (కాస్ప్-3), కాస్ప్-4 మరియు కాస్ప్-10 యొక్క జన్యు వ్యక్తీకరణను నిర్ణయించడానికి పరిమాణాత్మక నిజ-సమయ PCR వర్తించబడింది. క్లీవ్డ్ కాస్ప్ -3 వ్యక్తీకరణ వెస్ట్రన్ బ్లాట్ మరియు ఇమ్యునోఫ్లోరోసెన్స్ ఉపయోగించి పరిశోధించబడింది.

ఫలితాలు: DCLK1+ కణాల కోసం 5-Fu యొక్క IC50 24 మరియు 48-గంటల చికిత్స (p=0.002 మరియు 0.048) రెండింటికీ WT కణాల కంటే గణనీయంగా ఎక్కువగా ఉందని మా ఫలితాలు నిరూపించాయి, ఇది DCLK1+ కణాల కెమోరెసిస్టెన్స్‌ను పెంచడాన్ని సూచిస్తుంది. WT కణాలతో పోలిస్తే (p=7.616e-08, 1.575e-05 మరియు 5.307e-08, 5-Fu చికిత్స తర్వాత CASP-3, casp-4 మరియు casp-10 యొక్క జన్యు వ్యక్తీకరణ DCLK1+ కణాలలో గణనీయంగా నిరోధించబడింది. వరుసగా). WT కణాలతో (p = 0.015) పోలిస్తే 5-Fu చికిత్స తర్వాత DCLK1+ కణాలలో క్లీవ్డ్ కాస్ప్-3 మొత్తం మరియు కాస్ప్-3 పాజిటివ్ కణాలు గణనీయంగా తగ్గాయి.

ముగింపులు: ముగింపులో, అపోప్టోసిస్ మార్గంలో కీ కాస్‌పేస్‌ల జన్యు వ్యక్తీకరణను అణచివేయడం ద్వారా మరియు అపోప్టోసిస్ పాత్వేని సక్రియం చేయడం ద్వారా DCLK1 ఓవర్ ఎక్స్‌ప్రెషన్ CRC కణాల కెమోరెసిస్టెన్స్‌ను 5-ఫు చికిత్సకు మెరుగుపరిచిందని మా ఫలితాలు నిరూపించాయి. CRC రోగుల ప్రభావవంతమైన చికిత్స కోసం DCLK1 ఒక చమత్కారమైన చికిత్సా లక్ష్యం.