క్లినికల్ మైక్రోబయాలజీ: ఓపెన్ యాక్సెస్

నైరూప్య

సింగిల్-న్యూక్లియోటైడ్ పాలీమార్ఫిజమ్‌ల ఆధారంగా రియల్-టైమ్ PCR ద్వారా బ్రూసెల్లా అబార్టస్ యొక్క అవకలన నిర్ధారణ

జి-యియోన్ కిమ్, సుంగ్-ఇల్ కాంగ్, జిన్ జు లీ, కిచన్ లీ, సో-రా సంగ్, సుక్ చాన్ జంగ్, యోంగ్ హో పార్క్, హాన్-సాంగ్ యూ మరియు మూన్ హర్

బ్రూసెల్లోసిస్‌ను ప్రభావవంతంగా నిర్ధారించడానికి, PCR ఆధారంగా అనేక జాతుల మరియు జాతుల-నిర్దిష్ట గుర్తింపు పద్ధతులు అభివృద్ధి చేయబడ్డాయి. సాంప్రదాయిక PCR పరీక్షలతో, నిజ-సమయ PCR పద్ధతులు వేగవంతమైన రోగనిర్ధారణ సాధనాలుగా అభివృద్ధి చేయబడ్డాయి. వాటిలో, హైబ్రిడైజేషన్ ప్రోబ్ (హైబ్‌ప్రోబ్) ఉపయోగించి నిజ-సమయ PCR జాతుల మధ్య అధిక DNA హోమోలజీ ఉన్న బ్యాక్టీరియా కోసం సిఫార్సు చేయబడింది, దీనితో యాంప్లిఫికేషన్ కర్వ్ మరియు మెల్టింగ్ పీక్ విశ్లేషణ ద్వారా ఖచ్చితమైన రోగ నిర్ధారణ చేయడం సాధ్యపడుతుంది. B. అబార్టస్ కోసం ఒక హైబ్‌ప్రోబ్ fbaA జన్యువుపై ఒక నిర్దిష్ట సింగిల్ న్యూక్లియోటైడ్ పాలిమార్ఫిజం (SNP) నుండి రూపొందించబడింది. ఈ ప్రోబ్ 69°C వద్ద ద్రవీభవన శిఖరాన్ని అందించిన సుమారు 14వ చక్రం నుండి B. అబార్టస్ యొక్క నిర్దిష్ట విస్తరణను మాత్రమే చూపింది. నిజ-సమయ PCR యొక్క సున్నితత్వం 10 రెట్లు DNA పలుచన ద్వారా 20 fg/μl అని వెల్లడైంది మరియు క్లినికల్ నమూనాలలో గుర్తించే పరిమితి 4 CFU. ఈ నిజ-సమయ PCR సాంప్రదాయిక PCR మరియు Taqman ప్రోబ్ ఆధారంగా మునుపటి నిజ-సమయ PCR కంటే ఎక్కువ సున్నితత్వాన్ని చూపించింది. అందువల్ల, ఈ కొత్త నిజ-సమయ PCR పరీక్ష B. అబార్టస్ ఇన్‌ఫెక్షన్‌ను వేగంగా మరియు ఖచ్చితత్వంతో వేరు చేయడానికి సహాయపడుతుంది.