ఫార్మాస్యూటికా అనలిటికా ఆక్టా

నైరూప్య

మానవ ప్లాస్మాలో ట్రిమిప్రమైన్ మలేట్‌ను నిర్ణయించడానికి LC-MS/MS పద్ధతి అభివృద్ధి మరియు ధ్రువీకరణ

వెంకట సాయిరాం కోగంటి, సేకూరి శశిధర్ రెడ్డి, జ్యోతిగౌడాపుర చన్నబసప్ప తేజస్విని, గురుపాదయ్య బన్నిమఠం

ఓపిప్రమోల్ డైహైడ్రోక్లోరైడ్‌ను అంతర్గత ప్రమాణంగా (ISTD) ఉపయోగించి మానవ ప్లాస్మాలో ట్రిమిప్రమైన్ మెలేట్‌ని నిర్ణయించడానికి సరళమైన, సున్నితమైన, లిక్విడ్ క్రోమాటోగ్రఫీ-టాండమ్ మాస్ స్పెక్ట్రోమెట్రీ (LC-MS/MS) పద్ధతి అభివృద్ధి చేయబడింది. మిథనాల్ ఉపయోగించి ప్రొటీన్ అవక్షేప పద్ధతి ద్వారా ప్లాస్మా నుండి విశ్లేషణ మరియు ISTD వేరుచేయబడ్డాయి. ZORBAX ECLIPSE XDB-C18 నిలువు వరుస (4.6 x 150 mm, 5 µm)పై క్రోమాటోగ్రాఫిక్ విభజన జరిగింది. 1.0 ml/min ప్రవాహం రేటుతో 25:75(v/v) నిష్పత్తిలో 0.1% ఫార్మిక్ యాసిడ్ మరియు మిథనాల్‌తో 5mM అమ్మోనియం ఫార్మేట్‌తో కూడిన ఐసోక్రటిక్ మొబైల్ ఫేజ్‌తో ఎల్యూషన్ చేయబడింది. ట్రిమిప్రమైన్ మరియు ఓపిప్రమోల్ వరుసగా m/z 295.20→100.10 మరియు m/z 364.30→171.20 వద్ద ప్రోటాన్ అడక్ట్‌లతో బహుళ ప్రతిచర్య పర్యవేక్షణ (MRM) పాజిటివ్ మోడ్‌లో కనుగొనబడ్డాయి. ట్రిమిప్రమైన్ మరియు ISTD యొక్క నిలుపుదల సమయం వరుసగా 1.67నిమి మరియు 1.48నిమి.లుగా కనుగొనబడింది. అమరిక వక్రతలు 0.1 నుండి 100.1 ng/ml ఏకాగ్రత పరిధిపై సరళంగా ఉన్నాయి. పరిమాణీకరణ యొక్క తక్కువ పరిమితి 0.1 ng/mlగా కనుగొనబడింది. సరళత, ఖచ్చితత్వం & ఖచ్చితత్వం, మాతృక కారకం, పునరుద్ధరణ, ఎంపిక మరియు స్థిరత్వం కోసం EMEA (యూరోపియన్ ఔషధాల ఏజెన్సీ) మార్గదర్శకాల ద్వారా ఈ పద్ధతి ధృవీకరించబడింది. ధృవీకరణ పారామితులు అంగీకార పరిమితిలో బాగా ఉన్నట్లు కనుగొనబడింది.