జర్నల్ ఆఫ్ స్టెమ్ సెల్ రీసెర్చ్ & థెరపీ

నైరూప్య

సీరమ్ ఫ్రీ మీడియాలో డైరెక్ట్ ఫీడర్ కాంటాక్ట్ లేకుండా పంది ప్రేరిత ప్లూరిపోటెంట్ స్టెమ్ సెల్స్ సంస్కృతి

యాంగ్ JY, లియు Y, Yu P, Lu Y, Hutcheson JM, Lau VW, Li X, Dove CR, Stice SL మరియు వెస్ట్ FD

నేపథ్యం: పిగ్ సోమాటిక్ కణాలను ప్రేరేపిత ప్లూరిపోటెంట్ స్టెమ్ సెల్స్ (iPSCలు)లోకి రీప్రోగ్రామింగ్ చేయడం ప్రాథమిక జీవశాస్త్రం, వ్యాధి నమూనా అభివృద్ధి మరియు జెనోట్రాన్స్‌ప్లాంటేషన్‌లో మంచి అప్లికేషన్‌లను కలిగి ఉంది. మౌస్‌లో, ఎంబ్రియోనిక్ స్టెమ్ సెల్ (ESC) సాంకేతికత జన్యు లక్ష్యం, సంక్లిష్ట స్క్రీనింగ్ వ్యూహాలు మరియు ఆసక్తి యొక్క ప్రత్యేక లక్షణాలను చూపించే జంతువుల సృష్టిని ప్రారంభించే రంగంలో విప్లవాత్మక మార్పులు చేసింది. పిగ్‌లోని ప్రేరేపిత ప్లూరిపోటెంట్ స్టెమ్ సెల్ టెక్నాలజీని ఉపయోగించి ఇటీవలి పురోగతులు జెర్మ్‌లైన్ చిమెరిక్ కాంపిటెంట్ మౌస్ ESCలను పోలి ఉండే పిగ్ ప్లూరిపోటెంట్ స్టెమ్ సెల్‌లను ఉత్పత్తి చేయడం సాధ్యం చేశాయి. అయినప్పటికీ, piPSC విస్తరణ కోసం సరైన సంస్కృతి వ్యవస్థ ఇంకా అభివృద్ధి చేయబడలేదు. చాలా నివేదికలు పిపిఎస్‌సిలను నిర్వచించని సిస్టమ్‌లలో నిర్వహించాయి, అవి కలుషితానికి సంభావ్య వనరులు అయిన జెనోప్రొడక్ట్‌లు మరియు ఫీడర్ లేయర్‌లను ఉపయోగిస్తాయి. పద్ధతులు: ఈ అధ్యయనంలో, ఆరు రీప్రొగ్రామింగ్ జన్యువులను అతిగా ఎక్స్‌ప్రెస్ చేయడం ద్వారా పిగ్ ఫైబ్రోబ్లాస్ట్ కణాల నుండి పిగ్ ఐపిఎస్‌సిల (పిపిఎస్‌సి) కొత్త లైన్లు ఉత్పత్తి చేయబడ్డాయి: POU5F1, SOX2, NANOG, LIN28, KLF4 మరియు C-MYC. స్థాపించబడిన మౌస్ 2i+LIF సిస్టమ్, హ్యూమన్ mTeSR1 సిస్టమ్ మరియు ఫీడర్ కండిషన్డ్ మీడియా సిస్టమ్ యొక్క వైవిధ్యాలలో మ్యాట్రిజెల్ సబ్‌స్ట్రేట్‌పై నిర్వహించగల సామర్థ్యం కోసం ఈ కొత్త లైన్‌లు పరీక్షించబడ్డాయి. ఇమ్యునోసైటోకెమిస్ట్రీ, ఫ్లో సైటోమెట్రీని ఉపయోగించి మరియు పిండ శరీర నిర్మాణం మరియు భేదాన్ని పరిశీలించడం ద్వారా piPSC ల యొక్క విశ్లేషణ మరియు గుర్తింపు జరిగింది. ఫలితాలు: కొత్తగా రూపొందించబడిన పిపిఎస్‌సిలు ఐపిఎస్‌సిలకు అనుగుణమైన ఎండోజెనస్ ప్లూరిపోటెన్సీ నెట్‌వర్క్‌ల పదనిర్మాణ లక్షణాలు, ఇమ్యునోరేయాక్టివిటీ మరియు రీయాక్టివేషన్‌ను చూపించాయి. ఫీడర్‌లపై కల్చర్ చేయబడిన కణాల మాదిరిగానే, మొత్తం 7 ఫీడర్-రహిత పరిస్థితులలో నిర్వహించబడే piPSCలు POU5F1 మరియు NANOG, SSEA-1, SSEA-4 మరియు TRA1-81లను వ్యక్తీకరించాయి. అయితే, ఫ్లో సైటోమెట్రీ 2i+LIF లేదా mTeSR1 సిస్టమ్‌లో కల్చర్ చేయబడిన కణాల కంటే నాక్‌అవుట్ సీరమ్ రీప్లేస్‌మెంట్ మరియు బేసిక్ ఫైబ్రోబ్లాస్ట్ గ్రోత్ ఫ్యాక్టర్ (FGF2)తో ఫీడర్ కండిషన్డ్ మీడియాలో కల్చర్ చేయబడిన piPSCలు SSEA1 మరియు SSEA4 వ్యక్తీకరణల యొక్క అధిక స్థాయిలను చూపించాయి. తీర్మానం: సీరం మరియు డైరెక్ట్ ఫీడర్ కాంటాక్ట్ లేకుండా నిర్వచించిన సిస్టమ్‌లలో piPSC లను నిర్వహించవచ్చని ఈ పరిశోధనలు చూపిస్తున్నాయి, వ్యవసాయ మరియు బయోమెడికల్ రంగాలలో వాటి సంభావ్య వినియోగాన్ని పెంచుతాయి.