జర్నల్ ఆఫ్ బ్లడ్ డిజార్డర్స్ & ట్రాన్స్‌ఫ్యూజన్

నైరూప్య

క్లినికల్ ట్రయల్స్ కోసం హ్యూమన్ ఎండోథెలియల్ ప్రొజెనిటర్ మరియు ఎండోథెలియల్ సెల్స్ యొక్క క్రియోప్రెజర్వేషన్ మరియు ఎన్యూమరేషన్

బోగోస్లోవ్స్కీ T, వాంగ్ D, మారిక్ D, స్కాటర్‌గుడ్-కీపర్ L, స్పాట్జ్ M, Auh S మరియు హాలెన్‌బెక్ J

నేపథ్యం: ఎండోథెలియల్ ప్రొజెనిటర్ కణాలు (EPC) ఎండోథెలియల్ గాయం యొక్క గుర్తులు మరియు ఇంటర్వెన్షనల్ క్లినికల్ ట్రయల్స్‌లో వాస్కులర్ రిపేర్ కోసం సర్రోగేట్ మార్కర్‌గా ఉపయోగపడతాయి. ఈ అధ్యయనం యొక్క లక్ష్యాలు పరిధీయ రక్త మోనోన్యూక్లియర్ కణాల (PBMC) యొక్క ఐసోలేషన్ పద్ధతిని సవరించడం మరియు పరిధీయ రక్తం నుండి EPC మరియు పరిపక్వ ఎండోథెలియల్ కణాల (EC) గణన మరియు PBMC యొక్క సాధ్యతపై మరియు EPC మరియు EC సంఖ్యలపై క్రయోప్రెజర్వేషన్ ప్రభావాన్ని అంచనా వేయడం. . రోగులు/పద్ధతులు: CPT (సెల్ ప్రిపరేషన్ ట్యూబ్‌లు)లో సేకరించిన తాజాగా వివిక్త PBMCలో ఆరోగ్యకరమైన వాలంటీర్లలో EPC మరియు ECలు విశ్లేషించబడ్డాయి మరియు PBMC క్రయోప్రెజర్డ్‌లో ఉన్నాయి: 1) గిబ్కో రికవరీ TM సెల్ కల్చర్ ఫ్రీజింగ్ మీడియం, 2) కస్టమ్ ఫ్రీజింగ్ మీడియం. DAPI ఉపయోగించి PBMC యొక్క సాధ్యత పరీక్షించబడింది. CD45- CD34+CD133+/-VEGFR2+/- కోసం EPC మరియు CD45-CD146+CD34+/-VEGFR2+/- కోసం EC గేట్ చేయబడ్డాయి. ఫలితాలు: -80°C వద్ద 7 రోజులపాటు క్రయోప్రెజర్వేషన్ ఆచరణీయమైన PBMCని 94 ± 0.5% (తాజా) నుండి 84 ± 4% (కస్టమ్ మీడియం)కి మరియు 69 ± 8% (గిబ్కో మాధ్యమం)కి తగ్గించింది, అయితే క్రయోప్రెజర్వేషన్ -65°C వద్ద ఉంది. సాధ్యత 60 ± 6% (p<0.001, అనుకూల మాధ్యమం) మరియు 49కి తగ్గింది ± 5% (p<0.001, గిబ్కో మీడియం). తాజా నమూనాలలో ప్రారంభ EPC (CD45- CD34+CD133+VEGFR2+) 0.2 ± 0.06%, లేట్ EPC(CD45-CD146+CD34+VEGFR2+) 0.6 ± EC మరియు mature 0.1%గా లెక్కించబడ్డాయి. (CD45-CD146+CD34-VEGFR2+) ప్రత్యక్ష PBMCలో 0.8 ± 0.3%. గిబ్కోతో క్రయోప్రెజర్వేషన్ మరియు కస్టమ్ ఫ్రీజింగ్ మీడియం -80ºC వద్ద 7 రోజుల పాటు EPC మరియు EC సంఖ్యలు తగ్గాయి, అయితే, ఈ తగ్గుదల గణాంకపరంగా ముఖ్యమైనది కాదు. తీర్మానాలు: 7 రోజుల పాటు -80°C వద్ద క్రయోప్రెజర్వేషన్ తగ్గుతుందని మా డేటా సూచిస్తుంది, అయితే గణనీయంగా లేనప్పటికీ, PBMC యొక్క సాధ్యత మరియు EC మరియు EPC యొక్క ఉపసమితుల సంఖ్యలు. ఈ పద్ధతి మల్టీసెంటర్ ట్రయల్స్‌కు అనువైన EPC యొక్క ఉపసమితులు మరియు పరిపక్వ EC యొక్క ఐసోలేషన్ మరియు స్వల్పకాలిక క్రియోప్రెజర్వేషన్‌కు అనుకూలమైన విధానాన్ని అందించవచ్చు.