జర్నల్ ఆఫ్ మైక్రోబియల్ & బయోకెమికల్ టెక్నాలజీ

నైరూప్య

రెండు ఎర్వినియా కరోటోవోరా L-ఆస్పరాగినేస్ II నిర్మాణాల మధ్య పోలిక: క్లోనింగ్, హెటెరోలాగస్ ఎక్స్‌ప్రెషన్, ప్యూరిఫికేషన్ మరియు కైనెటిక్ క్యారెక్టరైజేషన్

ప్రిస్కిలా లాంబ్ వింక్, హీక్ మార్లిస్ బొగ్దావా, గాబీ రెనార్డ్, జోస్లీ మరియా చీస్, లూయిజ్ అగస్టో బస్సో మరియు డిజెనెస్ శాంటియాగో శాంటోస్

Erwinia carotovora నుండి L-ఆస్పరాగినేస్ II తీవ్రమైన బాల్య లింఫోబ్లాస్టిక్ లుకేమియా చికిత్సలో ముఖ్యమైన ప్రత్యామ్నాయ చికిత్సను సూచించవచ్చు, ప్రస్తుతం ఈ వ్యాధి చికిత్సలో ఉపయోగించే ఎస్చెరిచియా కోలి మరియు ఎర్వినియా క్రిసాంథెమి L-ఆస్పరాగినేస్ II కంటే తక్కువ గ్లూటామినేస్ కార్యకలాపాలు ఆశాజనకంగా ఉన్నప్పటికీ. E. carotovora L-ఆస్పరాగినేస్ II: (AspSP)తో మరియు సిగ్నల్ పెప్టైడ్ (AspMP) లేకుండా స్థిరమైన స్థితి గతి పారామితుల యొక్క క్లోనింగ్, వ్యక్తీకరణ, శుద్దీకరణ మరియు నిర్ణయాన్ని ఇక్కడ మేము వివరిస్తాము. AspMP 91% దిగుబడితో ఒకే-దశ ప్రోటోకాల్ ద్వారా సజాతీయతకు శుద్ధి చేయబడింది మరియు 28% దిగుబడితో రెండు-దశల ప్రోటోకాల్ ద్వారా AspSP శుద్ధి చేయబడింది. అదనంగా, రెండు ఎంజైమ్‌లు ఒకే విధమైన అధిక నిర్దిష్ట కార్యకలాపాలను అందించాయి: వరుసగా 208.1 మరియు 237.6 U mg ^-1 . Km మరియు k _{పిల్లి} విలువలు AspMP కంటే AspMP తక్కువ గ్లుటామినేస్ కార్యాచరణను కలిగి ఉన్నట్లు చూపించాయి. అంతేకాకుండా AspMP సరళమైన శుద్దీకరణ ప్రోటోకాల్ ద్వారా మరియు అధిక దిగుబడితో ఉత్పత్తి చేయబడుతుంది. ఈ ప్రక్రియ పెద్ద ఎత్తున ఉత్పత్తికి అనుకూలంగా ఉంటుంది మరియు పరిశోధకులు మరియు బయోఫార్మాస్యూటికల్ కంపెనీలకు ఆసక్తిని కలిగిస్తుంది