జర్నల్ ఆఫ్ స్టెమ్ సెల్ రీసెర్చ్ & థెరపీ

నైరూప్య

వివిధ భేద పరిస్థితులలో హెపాటోసైట్ లాంటి కణాలలోకి మానవ కొవ్వు స్ట్రోమల్ కణాల రసాయన ప్రేరణ

కొరోనాడో రామన్, సోమరకి-కోర్మియర్ మారియా, నటేసన్ షణ్ముగసుందరం, క్రిస్టీ రాబర్ట్, ఓంగ్ జూ మరియు హాఫ్ గ్లెన్

నేపధ్యం: మార్పిడి కోసం దాత కాలేయాల కొరత కారణంగా చివరి దశ కాలేయ వ్యాధికి చికిత్స చేయడానికి మొత్తం అవయవ మార్పిడికి ప్రత్యామ్నాయంగా సెల్ థెరప్యూటిక్స్‌పై ఆసక్తి పెరిగింది. ప్రాథమిక మానవ హెపటోసైట్‌లు కణ ఆధారిత చికిత్సలలో ఉపయోగించబడ్డాయి. అయినప్పటికీ, హెపటోసైట్లు విట్రోలో వృద్ధి చెందవు కాబట్టి విజయవంతమైన మార్పిడి కోసం తగినంత కణాలను పెంచడం సవాలుగా ఉంది. హెపాటోసైట్-వంటి కొవ్వు-ఉత్పన్నమైన మెసెన్చైమల్ స్ట్రోమల్/స్టెమ్ సెల్స్ (ASCలు) హెపాటోసైట్-వంటి కణాలుగా విభజించబడి ప్రత్యామ్నాయంగా ఉపయోగించాలని చాలామంది సూచించారు. ఈ కణాలు ప్రాథమిక హెపాటోసైట్ సెల్ పదనిర్మాణం మరియు పనితీరును ఎంత దగ్గరగా పోలి ఉంటాయో ఇక్కడ మేము అంచనా వేస్తాము.
పద్ధతులు: మానవ ASCలు యాంత్రికంగా లిపోఆస్పిరేట్స్ నుండి వేరుచేయబడ్డాయి. ASC ల యొక్క స్టెమ్ సెల్ స్వభావం ఫ్లో సైటోమెట్రీ మరియు ట్రై-లీనేజ్ డిఫరెన్సియేషన్‌ను ఆస్టియోసైట్‌లు, అడిపోసైట్‌లు మరియు కొండ్రోసైట్‌లుగా ఉపయోగించి వర్గీకరించబడింది. వృద్ధి కారకాలు మరియు చిన్న అణువుల కలయికలను కలిగి ఉన్న వివిధ ప్రోటోకాల్‌లను ఉపయోగించి ASC లు సంస్కృతిలో హెపాటోసైట్ లాంటి కణాలుగా విభజించబడ్డాయి. ప్రాథమిక ASCలు త్వరగా జతచేయబడి, విట్రోలో విస్తరించి , ఒక సజాతీయ కుదురు లాంటి సెల్ మోనోలేయర్‌ను ఏర్పరుస్తాయి. మెసెన్చైమల్ మూలకణాలు CD73, CD90, CD271, CD44, CD166, CD105 మార్కర్ల యొక్క అధిక వ్యక్తీకరణను చూపించాయి మరియు ఆస్టియోసైట్‌లు, కొండ్రోసైట్‌లు మరియు అడిపోసైట్‌లుగా విజయవంతంగా విభజించబడ్డాయి. ASCలు టైప్ I కొల్లాజెన్ కోటెడ్ ప్లేట్‌లపై కల్చర్ చేయబడ్డాయి మరియు 5 వేర్వేరు ప్రోటోకాల్‌లను ఉపయోగించి హెపాటోసైట్ లాంటి కణాలుగా విభజించబడ్డాయి.
ఫలితాలు: ప్రోటోకాల్ C (FGF4తో ఇండక్షన్ మరియు HGF, ITSPre, Dex, OncM మరియు 2% సీరమ్‌తో పరిపక్వత) ఉపయోగించి, హెపాటోసైట్ లాంటి కణాలుగా విభజించబడిన ASCలు క్యూబాయిడల్ పదనిర్మాణాన్ని ప్రదర్శిస్తాయి. బయోయాక్టివిటీ పరీక్షలు యూరియాను సంశ్లేషణ చేయడం, LDLని తీసుకోవడం మరియు గ్లూకోజ్‌ను జీవక్రియ చేయడం వంటి వాటి సామర్థ్యాన్ని ప్రదర్శించాయి; హెపటోసైట్‌ల యొక్క అన్ని కార్డినల్ లక్షణాలు, విభిన్నమైన ASCలలో ఉండవు. జన్యు వ్యక్తీకరణ విశ్లేషణ TDO2, ALB, HNF1B1, HNF6b, HNF4a మరియు AFPలతో సహా కాలేయ పనితీరులో ముఖ్యమైన పాత్ర పోషిస్తున్న అనేక జన్యువుల వ్యక్తీకరణను కూడా చూపించింది. అయినప్పటికీ, ఈ అధ్యయనంలో పొందిన అత్యుత్తమ హెపాటోసైట్-వంటి ప్రేరిత ASC కూడా ప్రాథమిక మానవ హెపటోసైట్‌లతో పోలిస్తే చాలా తక్కువ హెపాటోసైట్-సంబంధిత జన్యు వ్యక్తీకరణ స్థాయిలను కలిగి ఉంది.
ముగింపు: మేము విజయవంతంగా ASCలను హెపాటోసైట్-వంటి కణాలుగా విభజించాము; ప్రోటోకాల్ సి ప్రాథమిక హెపటోసైట్‌లలో సాధారణంగా కనిపించే పదనిర్మాణం మరియు పనితీరు ఆధారంగా అత్యుత్తమ హెపాటోసైట్ లాంటి కణాలను ఉత్పత్తి చేస్తుంది. ఫలితాలు కొంత హెపాటోసైట్-సంబంధిత పనితీరును ప్రదర్శించినప్పటికీ, బయోయాక్టివిటీ మరియు హెపాటోసైట్-వంటి కణాల జన్యు వ్యక్తీకరణ ప్రాథమిక మానవ హెపటోసైట్‌ల కంటే చాలా తక్కువగా ఉన్నాయి, హెపటోసైట్‌లను భర్తీ చేయడానికి భిన్నమైన హెపాటోసైట్-వంటి ASC లను ఉపయోగించడాన్ని పరిగణించేటప్పుడు జాగ్రత్త వహించాలని సూచిస్తున్నాయి. హెపాటోసైట్-వంటి ASCల యొక్క క్రియాత్మక సామర్థ్యాన్ని బాగా అర్థం చేసుకోవడానికి మరిన్ని అధ్యయనాలు అవసరం మరియు నిర్దిష్ట జీవక్రియ పనితీరు చికిత్సా అనువర్తనాలను సమర్థవంతంగా అందించగలదు.