ఫార్మాస్యూటికా అనలిటికా ఆక్టా

నైరూప్య

RPHPLC ద్వారా విటమిన్ D3 అంచనా కోసం మెరుగైన మరియు సున్నితమైన పద్ధతి

సుబోధ్ కుమార్, దివేష్ చావ్లా మరియు అశోక్ కుమార్ త్రిపాఠి

సూర్యరశ్మి పుష్కలంగా ఉన్నప్పటికీ, భారతదేశంలో విటమిన్ డి లోపం (VDD) ఒక అంటువ్యాధి. అన్ని వయస్సుల మధ్య 50-90% జనాభా VDDతో సంబంధం కలిగి ఉంది. విటమిన్ డి అంచనా కోసం అందుబాటులో ఉన్న సాధారణ పద్ధతుల్లో (RIA, ఇమ్యునోఅస్సే మొదలైనవి), HPLC వంటి విశ్లేషణాత్మక పద్ధతి బంగారు ప్రమాణంగా పరిగణించబడుతుంది. ప్రతిపాదిత అధ్యయనంలో, మేము మరింత ఖచ్చితత్వం మరియు ఖచ్చితత్వంతో విటమిన్ D3 యొక్క అంచనా కోసం RP-HPLC పద్ధతిని అభివృద్ధి చేసాము. రెండు వేర్వేరు మొబైల్ దశలు అంటే అసిటోనిట్రైల్: మిథనాల్ (పద్ధతి I) మరియు మిథనాల్: 0.1% ఫార్మిక్ యాసిడ్ (పద్ధతి II) కలిగిన నీరు ఉపయోగించి ఐసోక్రటిక్ మోడ్‌లో C18 కాలమ్‌పై విభజన సాధించబడింది. కాలమ్ 40 °C వద్ద నిర్వహించబడింది మరియు మొబైల్ దశ 0.4 mL min−1 ప్రవాహం రేటుతో పంప్ చేయబడింది. ఎలుయెంట్ యొక్క గుర్తింపు λmax 265 nm వద్ద జరిగింది. పద్ధతి I మరియు II కోసం విటమిన్ D3 నిలుపుదల సమయం R2>0.99తో వరుసగా 7.14 మరియు 7.01 నిమిషాలుగా కనుగొనబడింది. ప్రామాణిక వక్రతలు 0.5-5 ng mL−1 గాఢత పరిధిపై సరళంగా ఉన్నాయి. I మరియు II పద్ధతికి విటమిన్ D3 కోసం LOD మరియు LOQ విలువలు వరుసగా 1.64, 5.02 మరియు 1.10, 3.60 ng mL−1గా గుర్తించబడ్డాయి. పద్దతి I మరియు IIకి వరుసగా 69-79% మరియు 75-87% శాతం రికవరీ ఉన్నట్లు కనుగొనబడింది. % RSD యొక్క ఇంట్రా మరియు ఇంటర్-డే ప్రెసిషన్ మెథడ్ I <2 మరియు <7% కనుగొనబడింది, అయితే, పద్ధతి II కోసం వరుసగా <2 మరియు <4%. ముగింపులో, పద్ధతి II ఎక్కువ ఖచ్చితత్వం మరియు ఖచ్చితత్వం మరియు ఖర్చుతో కూడుకున్నది, కాబట్టి, ఇది ప్రయోగశాల స్థాయిలో విటమిన్ D3 అంచనా కోసం ఉపయోగించవచ్చు.