జర్నల్ ఆఫ్ ప్లాంట్ పాథాలజీ & మైక్రోబయాలజీ

నైరూప్య

టొమాటో పండు నుండి పెపినో మొజాయిక్ వైరస్ RNA ఐసోలేషన్ యొక్క సులభమైన, వేగవంతమైన మరియు సమర్థవంతమైన పద్ధతి

అమల్ సౌయిరి, ముస్తఫా జెమ్జామి, ఖదీజా ఖతాబీ, హయత్ లాటిరిస్, సయీద్ అమ్జాజీ మరియు మౌలే ముస్తఫా ఎన్నాజీ

మొక్కలలో ఆర్‌ఎన్‌ఏ వైరల్ వ్యాధికారక కణాల పరమాణు గుర్తింపులో ప్రధాన ఆందోళన ఏమిటంటే, సేకరించిన ఆర్‌ఎన్‌ఏ మంచి నాణ్యతను సాధించడం. పాలీసాకరైడ్ అధికంగా ఉండే మరియు పేలవమైన కణజాలాలు మరియు ఇతర రీకాలిట్రెంట్ ప్లాంట్లు రెండింటి నుండి RNAలను వేరుచేసే వివిధ పద్ధతులు అందుబాటులో ఉన్నాయి. ఏది ఏమైనప్పటికీ, సమయం మరియు రియాజెంట్ వినియోగించే పద్ధతులు మరియు ప్రమాదకర రసాయనాలతో కూడిన వాటిని ఉపయోగించడం కొంత గజిబిజిగా మరియు సమస్యాత్మకంగా ఉంటుంది, ప్రత్యేకించి టొమాటో పండు నుండి వైరల్ ఆర్‌ఎన్‌ఏను వేరుచేయడం వంటి నిర్దిష్ట ప్రయోజనాల కోసం ఇది అవసరం లేనప్పుడు, అందుకే ఈ పేపర్ యొక్క లక్ష్యం. పెపినో మొజాయిక్ వైరస్ ( PepMV ) విషయంలో RNA వెలికితీత మరియు శుద్ధి దశలు లేకుండా టొమాటో పండు నుండి వైరల్ RNA ను తయారు చేయడానికి ప్రత్యామ్నాయ, సులభమైన మరియు వేగవంతమైన పద్ధతిని మేము వివరిస్తాము .

ఈ పద్ధతి నీటిలో యాంత్రిక చికిత్స మరియు సస్పెన్షన్‌ను ఉపయోగిస్తుంది. పొందిన RNA నాణ్యత స్పెక్ట్రోమెట్రిక్ రీడింగుల ద్వారా నిర్ణయించబడుతుంది మరియు RT-PCR పరీక్షలలో ధృవీకరించబడింది. ఉపయోగించిన ప్రోటోకాల్ సాధారణ TRIzol పద్ధతితో పోల్చబడింది. TRIzol పద్ధతితో పోల్చితే ప్రతిపాదిత పద్ధతిని ఉపయోగించి పొందిన RNA యొక్క దిగుబడి మరియు నాణ్యత సమర్థవంతంగా మరియు అధిక దిగుబడిని ఇస్తుందని ఫలితాలు చూపించాయి. అంతేకాకుండా, అభివృద్ధి చెందిన పద్ధతి RT-PCRలో PepMV అంచనా వేసిన బ్యాండ్‌ల యొక్క సున్నితమైన మరియు పునరుత్పాదక గుర్తింపును విజయవంతంగా అనుమతించింది. అందువల్ల, టొమాటో పండు నుండి PepMV యొక్క పరమాణు గుర్తింపును వేగవంతమైన RNA ఐసోలేషన్ లేకుండా మామూలుగా నిర్వహించవచ్చు. అలాగే, ఖరీదైన వాణిజ్య వస్తు సామగ్రి మరియు విషపూరిత రసాయనాలతో కూడిన ఇతర పద్ధతులతో పోల్చితే, టొమాటో పంటలకు సోకే ఇతర RNA వైరస్‌ల నిర్ధారణను సులభతరం చేస్తుంది మరియు తక్కువ సమయం తీసుకుంటుంది. చివరగా, ప్రపంచవ్యాప్తంగా టొమాటో పంటల ఫైటోసానిటరీ మరియు సర్టిఫికేషన్ ప్రోగ్రామ్‌ల వ్యూహాలలో వివరించిన ఏర్పాటు పద్ధతి ప్రభావవంతంగా దోహదపడుతుంది.