జర్నల్ ఆఫ్ స్టెమ్ సెల్ రీసెర్చ్ & థెరపీ

నైరూప్య

కణ మార్పిడి కోసం ఎలుక మెసెన్చైమల్ మూలకణాలను డోపమినెర్జిక్ న్యూరాన్‌లుగా మార్చడం

ర్యాన్ ఎమ్ వెల్చ్కో, ట్రావిస్ డి హల్స్, సబ్రినా ఎస్ డిఫెన్‌బాచ్, గాబ్రియెల్ పి షాల్, హువో వాంగ్జింగ్, లెస్లీ ఆర్ సీగల్, జారెడ్ ఆర్ వాటర్స్, లెవెక్యూ టి జేవియర్, మింగ్ లు, జూలియన్ రోసిగ్నోల్, మైఖేల్ ఐ శాండ్‌స్ట్రోమ్ మరియు గ్యారీ ఎల్ డన్‌బార్

లక్ష్యం: PD రోగుల స్ట్రియాటాలో మానవ పిండ డోపమినెర్జిక్ ప్రొజెనిటర్‌ల మార్పిడి ప్రోత్సాహకరమైన ఫలితాలను అందించింది, అయితే నైతిక ఆందోళనలు మరియు కణజాల లభ్యత ఈ విధానాన్ని పరిమితం చేస్తాయి. మెసెన్‌చైమల్ స్టెమ్ సెల్స్ (MSCs) ఉపయోగం కణాలకు తక్షణమే అందుబాటులో ఉండే మూలాన్ని అందిస్తుంది, ఎందుకంటే అవి పెద్దల కణజాలం నుండి తీసుకోబడ్డాయి. ఈ ఇన్ విట్రో అధ్యయనం ఒకే అడెనోవైరస్‌ని ఉపయోగించి DA న్యూరానల్ ఇండక్షన్ కోసం సెల్ సోర్స్‌గా MSCలను ఉపయోగించడాన్ని అన్వేషించింది.
పద్ధతులు: మా ల్యాబ్ DA న్యూరాన్ డిఫరెన్సియేషన్‌లో పాల్గొనే ట్రాన్స్‌క్రిప్షన్ కారకాల కోసం బహుళ జన్యువుల (Ascl1, Lmx1a మరియు Nurr1) పాలిసిస్ట్రోనిక్ వ్యక్తీకరణను అనుమతించే బహుళ వైరల్ 2A జన్యువులను వ్యక్తీకరించే నవల అడెనోవైరస్‌ను అభివృద్ధి చేసింది మరియు గ్రీన్ ఫ్లోరోసెంట్ ప్రోటీన్ (gfp) కోసం జన్యువును ఉపయోగించింది. బదిలీని ట్రాక్ చేయడానికి. MSC లు అడెనోవైరస్తో కల్చర్ చేయబడ్డాయి, మానిటర్ పదనిర్మాణ మార్పులు మరియు ఫ్లోరోసెన్స్ మైక్రోస్కోపీ ద్వారా రుజువు చేయబడిన gfp యొక్క వ్యక్తీకరణ. బదిలీ చేయబడిన కణాలలో వైరల్ DNA ఉనికిని PCR, ఇమ్యునోసైటోకెమిస్ట్రీ మరియు RTPCRతో నిర్ధారించారు.
ఫలితాలు: అడెనోవైరస్‌తో కల్చర్ చేయబడిన MSCలు, ఫ్లోరోసెన్స్ మైక్రోస్కోపీ ద్వారా రుజువు చేయబడినట్లుగా పదనిర్మాణ మార్పులు మరియు gfp యొక్క వ్యక్తీకరణకు దారితీశాయి. బదిలీ చేయబడిన కణాలలో వైరల్ DNA ఉనికి PCRతో నిర్ధారించబడింది. ఇమ్యునోసైటోకెమిస్ట్రీ మరియు RT-PCR విశ్లేషణలు, gfpని వ్యక్తీకరించే కణాలు అనువదించబడిన ట్రాన్స్‌క్రిప్షన్ కారకాలైన LMX1a మరియు NURR1 యొక్క న్యూక్లియర్ కో-లేబులింగ్‌ను కలిగి ఉన్నాయని, అలాగే ఈ జన్యువుల అప్-రెగ్యులేషన్‌తో పాటు దిగువ జన్యు లక్ష్యాల యొక్క అప్-రెగ్యులేషన్‌ను కలిగి ఉన్నాయని వెల్లడించింది. టైరోసిన్ హైడ్రాక్సిలేస్ (TH), మరియు డోపమైన్ ట్రాన్స్పోర్టర్ (DAT).