బయోకెమిస్ట్రీ & అనలిటికల్ బయోకెమిస్ట్రీ

నైరూప్య

ఎరి సిల్క్‌వార్మ్, ఫిలోసామియా రిసిని (లెపిడోప్టెరా: సాటునిడే) యొక్క ఫిఫ్త్ ఇన్‌స్టార్ లార్వాలో ప్రోటీన్ మరియు ఎంజైమ్‌ల స్థాయిలపై తక్కువ ఉష్ణోగ్రత ఎక్స్పోజర్ ప్రభావంపై టైమ్ కోర్సు అధ్యయనాలు

అనితా సింగ్, వివేక్ కుమార్ గుప్తా, నిఖత్ జమాల్ సిద్ధిఖీ, శైలీ తివారీ, అనితా గోపేష్ మరియు బెచన్ శర్మ

లాక్టేట్ డీహైడ్రోజినేస్ (LDH; EC 1.1.1.27) మరియు మలేట్ డీహైడ్రోజినేస్ (MDH; EC 1.1.1.37) అనేవి ఎరి సిల్క్‌వార్మ్, ఫిలోసామియా రిసిని యొక్క శక్తి జీవక్రియలో పాలుపంచుకున్న ఎంజైమ్‌లు. అయినప్పటికీ, ఎరి పట్టు పురుగు యొక్క వివిధ కణజాలాలలో వాటి స్థాయిలపై తక్కువ ఉష్ణోగ్రత బహిర్గతం ప్రభావం గురించి మునుపటి అధ్యయనం నివేదించబడలేదు. ప్రస్తుత అధ్యయనం మూడు ప్రధాన కణజాలాల (హేమోలింఫ్, పట్టు గ్రంథి మరియు కొవ్వు శరీరం) యొక్క ప్రోటీన్ మరియు శక్తి జీవక్రియ ఎంజైమ్‌ల స్థాయిలపై 5వ ఇన్‌స్టార్ P. రిసిని యొక్క తక్కువ ఉష్ణోగ్రత (~10°C) బహిర్గతం యొక్క సమయ-కోర్సు ప్రభావాలను లక్ష్యంగా చేసుకుంది. ఆముదం-ఆయిల్-ప్లాంట్ (రిసినస్ కమ్యూనిస్) యొక్క తాజా ఆకులపై పెంచబడిన ఎరి సిల్క్‌వార్మ్ లార్వాలను 4 గ్రూపులుగా విభజించారు: 25 ± 2 ° C వద్ద పెంచబడిన ఒక నియంత్రణ సమూహంతో పాటు 10 ± 1 ° C వద్ద 10 ± 1 ° C వద్ద పెంచబడిన మూడు ప్రయోగాత్మక సమూహాలతో పాటు 50 ప్రతి దానిలో లార్వా, వివిధ వ్యవధిలో (2, 4 మరియు 7 రోజులు). 9000 గ్రా వద్ద కణజాల సజాతీయతను సెంట్రిఫ్యూజ్ చేయడం ద్వారా సెల్ ఫ్రీ ఎక్స్‌ట్రాక్ట్ తయారు చేయబడింది మరియు బయోకెమికల్ అంచనాల కోసం (మొత్తం ప్రోటీన్ కంటెంట్, లాక్టేట్ డీహైడ్రోజినేస్ మరియు మేలేట్ డీహైడ్రోజినేస్ కార్యకలాపాలు) ఉపయోగించబడింది. ఐసోజైమ్ విశ్లేషణ కోసం, 0.2 M సుక్రోజ్ మరియు 10 mM EDTA కలిగిన బఫర్‌లో (0.2 M Tris HCl, pH 7.0) మరొక సజాతీయత (20% w/v) తయారు చేయబడింది మరియు స్థానిక-PAGE ద్వారా విశ్లేషించబడింది, ఆ తర్వాత కార్యాచరణ స్టెయినింగ్ చేయబడింది. లాక్టేట్ డీహైడ్రోజినేస్ మరియు మాలేట్ డీహైడ్రోజినేస్ యొక్క కార్యకలాపాలు హేమోలింఫ్‌లో గణనీయమైన తగ్గుదలని చూపించాయి, అయితే కొవ్వు శరీరాలలో రెండు ఎంజైమ్‌లు పెరిగిన కార్యాచరణను చూపించాయి. పట్టు గ్రంధిలో, లాక్టేట్ డీహైడ్రోజినేస్ చర్య ఏకరీతిగా తగ్గింది, అయితే మేలేట్ డీహైడ్రోజినేస్ చర్య అన్ని ఎక్స్పోజర్ వ్యవధిలో పెరిగింది. ఐసోజైమ్ విశ్లేషణ వారి వ్యక్తీకరణ ప్రొఫైల్‌లలో గణనీయమైన కదలికలను వెల్లడించింది. తక్కువ ఉష్ణోగ్రత బహిర్గతం ఫలితంగా హిమోలింఫ్‌లో ప్రోటీన్ కంటెంట్ చేరడం మరియు పట్టు గ్రంథి మరియు కొవ్వు శరీర కణజాలాలలో క్షీణత ఏర్పడింది. ఈ పరిస్థితిలో కొవ్వు శరీరాలు ప్రధాన శక్తిని ఉత్పత్తి చేసే అవయవంగా ఉద్భవించాయి. లాక్టేట్ డీహైడ్రోజినేస్ మరియు మేలేట్ డీహైడ్రోజినేస్ పరీక్షించిన అన్ని కణజాలాలలో ఒకే ఒక ఐసోజైమ్ ఉనికిని ప్రదర్శిస్తాయి. తక్కువ ఉష్ణోగ్రత వైపు లాక్టేట్ డీహైడ్రోజినేస్ మరియు మాలేట్ డీహైడ్రోజినేస్ యొక్క ఐసోజైమ్ ప్రవర్తన వివిధ కణజాలాలలో మారుతూ ఉంటుంది. ఈ ఎంజైమ్‌ల వ్యక్తీకరణ మరియు విధుల్లో మార్పులు తక్కువ ఉష్ణోగ్రత వద్ద లార్వాల అలవాటుతో సంబంధం కలిగి ఉండవచ్చని ఈ ఫలితాలు సూచించాయి.