జర్నల్ ఆఫ్ స్టెమ్ సెల్ రీసెర్చ్ & థెరపీ

నైరూప్య

ప్రేరిత ప్లూరిపోటెంట్ స్టెమ్ సెల్స్ నుండి తీసుకోబడిన త్రీ-డైమెన్షనల్ హ్యూమన్ న్యూరల్ టిష్యూ యొక్క స్ట్రక్చరల్ అనాలిసిస్

పాట్రిక్ టెరెన్స్ బ్రూక్స్, మిక్కెల్ అబెచ్ రాస్ముస్సేన్ మరియు పౌల్ హైటెల్

లక్ష్యం: ప్రేరేపిత ప్లూరిపోటెంట్ మూలకణాల (iPSCలు) నుండి తీసుకోబడిన త్రిమితీయ (3D) మానవ నాడీ కణజాలం ఉత్పత్తికి ఒక పద్ధతిని ఏర్పాటు చేయడం మరియు కణజాల అల్ట్రాస్ట్రక్చర్ మరియు నాడీ గుర్తుల వ్యక్తీకరణల కలయిక ద్వారా ఫలితాన్ని విశ్లేషించడం ప్రస్తుత అధ్యయనం లక్ష్యం.

పద్ధతులు: మానవ iPSCలను 3D పరంజా ఆధారిత న్యూరల్ డిఫరెన్సియేషన్ ప్రోటోకాల్‌కు గురి చేయడం ద్వారా రెండు-దశల సెల్ కల్చర్ విధానం అమలు చేయబడింది. మొదట, న్యూరోపీథెలియల్ మోనోలేయర్‌ను రూపొందించడానికి నాడీ విధిని ప్రేరేపించే చిన్న అణువులను ఉపయోగించారు. రెండవది, మోనోలేయర్ సింగిల్ సెల్స్‌గా ట్రిప్సినైజ్ చేయబడింది మరియు పోరస్ పాలీస్టైరిన్ స్కాఫోల్డ్‌గా సీడ్ చేయబడింది మరియు 3D నాడీ కణజాలాన్ని ఉత్పత్తి చేయడానికి మరింత కల్చర్ చేయబడింది. నాడీ కణజాలం ఇమ్యునోహిస్టోకెమిస్ట్రీ మరియు ట్రాన్స్మిషన్ ఎలక్ట్రాన్ మైక్రోస్కోపీ (TEM) కలయికతో వర్గీకరించబడింది .

ఫలితాలు: iPSCలు SOX2, Nestin, β-III Tubulin, MAP2, Tau, BLBP మరియు Ki67తో సహా నాడీ పుట్టుక కణాలు, ప్రారంభ నాడీ భేదం మరియు పరిపక్వత, రేడియల్ గ్లియల్ కణాలు మరియు సెల్యులార్ ప్రొలిఫరేషన్ కోసం మార్కర్‌లను వ్యక్తీకరించే 3D నాడీ కణజాలంగా అభివృద్ధి చేయబడ్డాయి. అభివృద్ధి చెందుతున్న న్యూరల్ ట్యూబ్ యొక్క పదనిర్మాణ శాస్త్రాన్ని పోలి ఉండే రోసెట్టే నిర్మాణాల సమృద్ధిని మేము కనుగొన్నాము. ఈ న్యూరల్ ట్యూబ్ లాంటి నిర్మాణాలు (NTLS) న్యూరల్ ప్రొజెనిటర్ సెల్ మెయింటెనెన్స్ మరియు ప్రొలిఫరేషన్ ప్రాంతాలను కలిగి ఉన్నట్లు చూపబడింది . లూమినల్ టైట్ జంక్షన్‌లు మరియు ప్రైమరీ సిలియాను ప్రదర్శించే TEM విశ్లేషణల ద్వారా పిండ నాడీ ట్యూబ్‌కు సారూప్యత మరింత మద్దతునిచ్చింది. అంతేకాకుండా, NTLSలో రేడియల్ గ్లియల్ లాంటి కణాలు ఉన్నాయి, ఇవి ల్యూమన్ నుండి ప్రసరిస్తాయి మరియు పొడుగుచేసిన న్యూక్లియైలను ప్రదర్శించే న్యూరల్ ప్రొజెనిటర్ కణాలు, ప్రారంభ న్యూరోజెనిసిస్ సమయంలో ఇంటర్‌కైనెటిక్ న్యూక్లియర్ మైగ్రేషన్‌లో కనిపించే న్యూక్లియస్ ట్రాన్స్‌పోజిషన్‌ను సూచిస్తాయి మరియు మైటోస్‌లను కలిగి ఉంటాయి.

ముగింపు: మానవ iPSCల కోసం ఈ సాపేక్షంగా సరళమైన 3D పరంజా-ఆధారిత న్యూరల్ డిఫరెన్సియేషన్ ప్రోటోకాల్ ప్రారంభ నాడీ అభివృద్ధిలో అనేక కీలక సంఘటనలను పునశ్చరణ చేయగలదని మా పరిశోధనలు వెల్లడించాయి. NTLSలోని సంస్థ మరియు ఈ నిర్మాణాల చుట్టూ ఉన్న కణజాలంలో పరిపక్వ నాడీ కణాల ఉనికి ఈ ప్రోటోకాల్ నాడీ అభివృద్ధి మరియు వ్యాధి మోడలింగ్ యొక్క విట్రో అధ్యయనాలకు సంభావ్యతను కలిగి ఉందని చూపించింది.