ఆధునిక కెమిస్ట్రీ & అప్లికేషన్స్

నైరూప్య

బాష్పీభవన దశ లేకుండా సీరం రిబావిరిన్ ఏకాగ్రతను నిర్ణయించడానికి చిన్న మరియు బలమైన HPLC-UV పద్ధతి

అబ్దుల్ రఫీక్ ఖాన్, అలీ అల్-ఓథైమ్, ఖలీద్ ముహమ్మద్ ఖాన్, షాజియా మ్ర్తజా, సారా అల్ట్రైఫ్, వలీద్ తమీమి, వకాస్ జమీల్ మరియు ఇబ్రహీం అల్ట్రైఫ్

లక్ష్యం: హెపటైటిస్ సి రోగిలో చికిత్సా ఔషధ పర్యవేక్షణ కోసం రిబావిరిన్ (RBV) యొక్క కొలత ముఖ్యమైనది. బాష్పీభవన దశ లేకుండా సీరం నమూనాలలో రిబావిరిన్ ఏకాగ్రతను కొలవడానికి సరళమైన మరియు వేగవంతమైన అధిక పనితీరు గల లిక్విడ్ క్రోమాటోగ్రఫీ (HPLC) పద్ధతి అభివృద్ధి చేయబడింది మరియు ధృవీకరించబడింది.

డిజైన్ మరియు పద్ధతి: సుమారు 500 μl సీరం నమూనా, 50 μl అంతర్గత ప్రమాణం మరియు 20 mM అమ్మోనియం అసిటేట్ బఫర్ (pH = 8.5) 30 సెకన్ల పాటు మిక్స్ చేయబడ్డాయి మరియు సెంట్రిఫ్యూజ్ చేయబడ్డాయి. ఘన దశ వెలికితీత కోసం సూపర్‌నాటెంట్ ముందస్తు షరతులతో కూడిన ఫినైల్ బోరోనిక్ యాసిడ్ కాట్రిడ్జ్‌లలోకి బదిలీ చేయబడింది. 10 mM అమ్మోనియం అసిటేట్ బఫర్ యొక్క 1 mLతో అన్ని గుళికలు వాక్యూమ్ కింద 10 psi మించకుండా రెండుసార్లు కడుగుతారు. రిబావిరిన్ మరియు అంతర్గత ప్రమాణాలు 300 μl 3% ఫార్మిక్ యాసిడ్‌తో తొలగించబడ్డాయి. 100 μl ఆల్కాట్ HPLC సిస్టమ్‌లోకి ఇంజెక్ట్ చేయబడింది.

ఫలితాలు: ఈ పద్ధతి 0.1-8.0 mg/l పరిధిలో 0.05 mg/lతో గుర్తించే పరిమితిగా ఉంది. పద్ధతి పోలిక యొక్క సహసంబంధ గుణకం 0.975 p విలువ 0.116 ఫలితాల యొక్క మంచి పునరుత్పత్తిని చూపుతుంది. సగటు ఖచ్చితత్వం మూడు వేర్వేరు సాంద్రతలలో తనిఖీ చేయబడింది మరియు మూడు స్థాయిలకు 107-110% మధ్య ఉన్నట్లు కనుగొనబడింది. వెలికితీత సామర్థ్యం 0.1-8.0 mg/l పరిధిలో రిబావిరిన్‌కు 65.5% మరియు అంతర్గత ప్రమాణం కోసం 50 mg/l వద్ద 71.2%. ఇంట్రా అస్సే ఖచ్చితత్వాలు 0.5, 2.5 మరియు 5.0 mg/l వద్ద నిర్ణయించబడ్డాయి మరియు % CV వరుసగా 2.2%, 5.0%, 4.5%గా గుర్తించబడ్డాయి. మూడు స్థాయిలలో ఇంజెక్షన్ పునరుత్పత్తి సామర్థ్యం 5.5%, 6.1% మరియు 3.3%. గురుత్వాకర్షణ ప్రవాహాన్ని తొలగించడం మరియు బాష్పీభవన దశ రిబావిరిన్ నమూనాల సాధారణ విశ్లేషణ కోసం ఈ పద్ధతిని వేగంగా మరియు సులభంగా చేసింది.

ముగింపు: కొత్తగా అభివృద్ధి చేయబడిన HPLC పద్ధతి వేగవంతమైనది, ఖచ్చితమైనది మరియు సున్నితమైనది. ఇది మా ఆసుపత్రిలో హెపటైటిస్ సి రోగిలో సీరం రిబావిరిన్ స్థాయిని నిర్ణయించడానికి దరఖాస్తు చేయబడింది.