జర్నల్ ఆఫ్ స్టెమ్ సెల్ రీసెర్చ్ & థెరపీ

నైరూప్య

ప్రీక్లినికల్ మోడలింగ్ SCID-X1 యొక్క దిద్దుబాటు కోసం హెమటోపోయిటిక్ స్టెమ్ సెల్ జీన్ ఎడిటింగ్ యొక్క చికిత్సా సామర్థ్యాన్ని హైలైట్ చేస్తుంది

గియులియా షిరోలి

హెమటోపోయిటిక్ స్టెమ్/ప్రొజెనిటర్ సెల్స్ (HSPCs)లో టార్గెటెడ్ జీనోమ్ ఎడిటింగ్ అనేది ఇమ్యునోహెమటోలాజికల్ వ్యాధుల చికిత్సకు ఒక ఆకర్షణీయమైన వ్యూహం. అయినప్పటికీ, ఆదిమ HSPC లలో హోమోలజీ-డైరెక్ట్ ఎడిటింగ్ యొక్క పరిమిత సామర్థ్యం సరిదిద్దబడిన కణాల దిగుబడిని అడ్డుకుంటుంది మరియు క్లినికల్ అనువాదం యొక్క సాధ్యత మరియు భద్రతను ప్రభావితం చేయవచ్చు. ఈ ఆందోళనలను కఠినమైన ప్రిలినికల్ మోడల్‌లలో పరిష్కరించాలి మరియు మరింత సమర్థవంతమైన సవరణ పద్ధతులను అభివృద్ధి చేయడం ద్వారా అధిగమించాలి. మేము మానవీకరించిన X-లింక్డ్ తీవ్రమైన కంబైన్డ్ ఇమ్యునో డిఫిషియెన్సీ (SCID-X1) మౌస్ మోడల్‌ను రూపొందించాము మరియు ఫంక్షనల్ HSPCల యొక్క పరిమిత ఇన్‌పుట్ నుండి హెమటోపోయిటిక్ పునర్నిర్మాణం యొక్క సమర్థత మరియు భద్రతను అంచనా వేసాము, వివిధ రకాల కండిషనింగ్‌లపై పూర్తి దిద్దుబాటు కోసం థ్రెషోల్డ్‌లను ఏర్పాటు చేసాము. ఊహించని విధంగా, తక్కువ సంఖ్యలో పూర్వీకులను మార్పిడి చేసేటప్పుడు అభివృద్ధి చెందుతున్న లింఫోమా నుండి ఎలుకలను రక్షించడానికి HSPC ఇన్ఫ్యూషన్ ముందు కండిషనింగ్ అవసరం. మేము ఒక-పరిమాణానికి సరిపోయే-అన్ని IL2RG (ఇంటర్‌లుకిన్-2 రిసెప్టర్ కామన్ γ-చైన్) జన్యు దిద్దుబాటు వ్యూహాన్ని రూపొందించాము మరియు మానవ HSPC యొక్క దిద్దుబాటుకు అనువైన అదే కారకాలను ఉపయోగించి, వివోలో వ్యాధి నమూనాలో సవరించబడిన మానవ జన్యువును ధృవీకరించాము, మౌస్ HSPCలలో టార్గెటెడ్ జీన్ ఎడిటింగ్ యొక్క సాక్ష్యాలను అందించడం మరియు IL2RG-సవరించిన లింఫోయిడ్ యొక్క కార్యాచరణను ప్రదర్శించడం సంతానం. చివరగా, మేము మానవ HSPCల కోసం ఎడిటింగ్ రియాజెంట్‌లు మరియు ప్రోటోకాల్‌ను ఆప్టిమైజ్ చేసాము మరియు వైద్యపరంగా సంబంధిత HSPC మూలాధారాలు మరియు అత్యంత నిర్దిష్టమైన జింక్ ఫింగర్ న్యూక్లియస్‌లు లేదా CRISPR (క్లస్టర్డ్ రెగ్యులర్ ప్యాలిన్ ఇంటర్‌స్పేమిక్‌లు) ఉపయోగించి వ్యాధిని సురక్షితంగా రక్షించగలదని అంచనా వేసిన దీర్ఘకాలిక రీపోపులేటింగ్ కణాలలో IL2RG ఎడిటింగ్ యొక్క థ్రెషోల్డ్‌ను సాధించాము. పునరావృతం)/Cas9 (CRISPR-అనుబంధ ప్రోటీన్ 9). మొత్తంమీద, మా పని SCID-X1 జన్యు సవరణ యొక్క క్లినికల్ అనువాదం కోసం హేతుబద్ధత మరియు మార్గదర్శక సూత్రాలను ఏర్పరుస్తుంది మరియు ఇతర వ్యాధుల కోసం జన్యు సవరణను అభివృద్ధి చేయడానికి ఫ్రేమ్‌వర్క్‌ను అందిస్తుంది.