సింగిల్ సెల్ బయాలజీ

నైరూప్య

ఫంక్షనల్ టెస్ట్‌ల ద్వారా ఉత్పరివర్తనాలను విశ్లేషించడానికి ముఖ్యమైన CFTR యొక్క సింగిల్ మ్యుటేషన్ యొక్క బహుళ-ఫంక్షనల్ పరిణామాలు

లాడెవెజ్ వి, ఫర్హత్ ఆర్, ఎల్ సీడీ ఎ మరియు కిట్జిస్ ఎ

సిస్టిక్ ఫైబ్రోసిస్ కాకేసియన్ జనాభాలో అత్యంత అరుదైన వ్యాధి. ఈ తీవ్రమైన వంశపారంపర్య తిరోగమన వ్యాధి సిస్టిక్ ఫైబ్రోసిస్ ట్రాన్స్‌మెంబ్రేన్ కండక్టెన్స్ రెగ్యులేటర్ (CFTR) జన్యువులోని ఉత్పరివర్తనాల వల్ల వస్తుంది. ఈ జన్యువు ఎపిథీలియల్ కణాల ఎపికల్ మెమ్బ్రేన్ వద్ద వ్యక్తీకరించబడిన ప్రోటీన్ కోసం ఎన్కోడ్ చేస్తుంది . ఉత్పరివర్తనలు వాటి ప్రభావాలు మరియు ఫినోటైప్ తీవ్రత ఆధారంగా ఆరు తరగతులుగా వర్గీకరించబడ్డాయి. F508delmutation అనేది CFTR జన్యువు యొక్క అత్యంత తరచుగా జరిగే మ్యుటేషన్; ఇది ప్రోటీన్ యొక్క తప్పుగా మడతపెట్టడాన్ని ప్రేరేపిస్తుంది, తద్వారా దాని పరిపక్వత, పొర స్థానికీకరణ మరియు చివరికి దాని కార్యాచరణను అడ్డుకుంటుంది.

ఈ అధ్యయనం c.1392G>T (p.Lys464Asn) CFTR ఎక్సాన్ 10 మ్యుటేషన్ యొక్క ఫిజియోపాథలాజికల్ పరిణామాలను గుర్తించడానికి క్లినికల్ విధానం మరియు బహుళ స్థాయి సెల్యులార్ విశ్లేషణలను మిళితం చేస్తుంది , ఇది ట్రాన్స్‌లో ఫ్రేమ్ షిఫ్ట్ తొలగింపు మరియు TG(11)తో CF రోగిలో కనుగొనబడింది. సిస్‌లో T(5). మొదట, వివిధ TG(m)T(n) యుగ్మ వికల్పాలతో మినీజీన్ ప్రయోగాల ద్వారా మరియు c.1392G>T యొక్క పరిణామాన్ని గుర్తించడానికి నాసికా సెల్ mRNA ఎక్స్‌ట్రాక్ట్‌ల ద్వారా స్ప్లికింగ్ అధ్యయనం చేయబడింది. అప్పుడు, p.Lys464Asn ప్రోటీన్ యొక్క ప్రాసెసింగ్ సెల్యులోలో, వెస్ట్రన్ బ్లాటింగ్ విశ్లేషణల ద్వారా మూల్యాంకనం చేయబడింది.

c.1392G>T మ్యుటేషన్ ఎక్సాన్ 10 స్ప్లికింగ్‌ను దాని పూర్తి తొలగింపును ప్రేరేపించడం మరియు ఫ్రేమ్ షిఫ్ట్ ట్రాన్‌స్క్రిప్ట్‌ను ఎన్‌కోడింగ్ చేయడం ద్వారా ప్రభావితం చేస్తుంది. పాలీమార్ఫిజం TG (11)T(5) సంక్లిష్ట యుగ్మ వికల్పం యొక్క ప్రాముఖ్యతను సూచిస్తూ, అసహజమైన స్ప్లికింగ్‌పై ఈ మ్యుటేషన్ యొక్క ప్రభావాలను పెంచుతుంది. ప్రసూతి వాయుమార్గ ఎపిథీలియల్ కణాల నుండి పొందిన mRNA యొక్క విశ్లేషణ సెల్యులో ఫలితాలలో వీటిని నిర్ధారించింది. ప్రోటీన్ స్థాయిలో p.Lys464Asn ప్రోటీన్ పూర్తిగా గ్లైకోసైలేటెడ్ రూపాన్ని చూపలేదు.

అందువలన, c.1392G>T మ్యుటేషన్ ఒంటరిగా లేదా పాలీ T ట్రాక్ట్‌తో అనుబంధంగా స్ప్లికింగ్ మరియు CFTR ప్రోటీన్ ప్రాసెసింగ్‌పై స్పష్టమైన ప్రభావాలను వెల్లడించింది. సి.[T(5); 1392G>T] సంక్లిష్ట యుగ్మ వికల్పం స్ప్లికింగ్‌ను ప్రభావితం చేయడం ద్వారా మరియు తీవ్రమైన తప్పు ప్రాసెసింగ్ లోపాన్ని ప్రేరేపించడం ద్వారా CF ఫినోటైప్‌కు దోహదం చేస్తుంది. క్లాసికల్ CFTR ఉత్పరివర్తనల వర్గీకరణ సరిపోదని ఈ ఫలితాలు చూపిస్తున్నాయి: రోగిలో సాధ్యమయ్యే సంక్లిష్ట యుగ్మ వికల్పం యొక్క వివో మరియు సెల్యులో అధ్యయనాలు సరైన CFTR మ్యుటేషన్ వర్గీకరణ, తగిన వైద్య సలహాలు మరియు స్వీకరించబడిన చికిత్సా వ్యూహాలను అందించడం అవసరం.