బయోకెమిస్ట్రీ & అనలిటికల్ బయోకెమిస్ట్రీ

నైరూప్య

స్థానిక మరియు డినాచరింగ్ పరిస్థితులలో ఎంజైమ్ కార్యాచరణ మరియు నిర్మాణంపై మాక్రోమోలిక్యులర్ క్రౌడింగ్ మరియు నిర్బంధ ప్రభావం

స్టీవెన్ లాంగ్, జెఫ్రీ కుంకెల్ మరియు ప్రశాంత్ అసూరి

మినహాయించబడిన వాల్యూమ్ ఎఫెక్ట్స్ కారణంగా రద్దీ మరియు నిర్బంధం రెండూ ఎంజైమ్ నిర్మాణం మరియు పనితీరుపై ప్రభావం చూపుతాయని ఇప్పుడు బాగా ప్రశంసించబడింది; అయినప్పటికీ, ప్రత్యక్ష పోలిక అధ్యయనాలు లేకపోవడం వల్ల ప్రోటీన్ ఫేట్స్‌పై ఈ పరిసరాల యొక్క సాపేక్ష సామర్థ్యాలు అస్పష్టంగా ఉన్నాయి. ఈ అధ్యయనంలో, గుర్రపుముల్లంగి పెరాక్సిడేస్ మరియు β-గెలాక్టోసిడేస్ అనే రెండు మోడల్ ఎంజైమ్‌ల ప్రవర్తనపై రద్దీ మరియు నిర్బంధం రెండింటి ప్రభావాలను పరిశోధించడానికి ఇన్ విట్రో ప్లాట్‌ఫారమ్‌ను అభివృద్ధి చేయడానికి బయోపాలిమర్ ఆల్జీనేట్ యొక్క ఉపయోగాన్ని మేము అన్వేషిస్తాము . ఆల్జినేట్, దాని పరిష్కార దశలో, క్రౌడింగ్ ఏజెంట్‌గా మరియు దాని జెల్ దశలో డైవాలెంట్ కాటయాన్‌లను ఉపయోగించి క్రాస్‌లింక్ చేయడం ద్వారా ప్రోటీన్‌లను ఎన్‌క్యాప్సులేట్ చేయడానికి మరియు పరిమితం చేయడానికి ఉపయోగించవచ్చు, తద్వారా రద్దీ మరియు నిర్బంధ ప్రభావాలను నేరుగా పోల్చడానికి అదే వ్యవస్థను ఉపయోగించడానికి అనుమతిస్తుంది. ఆల్జీనేట్ ఏకాగ్రతను మార్చడం ద్వారా వివిధ స్థాయిలలో రద్దీ మరియు నిర్బంధం సాధించబడింది మరియు ఈ అధ్యయనాలు రద్దీ మరియు నిర్బంధ స్థాయిపై ఎంజైమ్ కార్యకలాపాల యొక్క స్పష్టమైన ఆధారపడటాన్ని ప్రదర్శించాయి. అంతేకాకుండా, క్రాస్‌లింక్డ్ ఆల్జీనేట్ జెల్స్‌లో ప్రోటీన్ నిర్బంధం క్రాస్‌లింక్డ్ కాని రద్దీ వాతావరణాలకు సంబంధించి డీనాటరింగ్ పరిస్థితులలో ఎంజైమ్ కార్యకలాపాలలో అధిక మెరుగుదలలకు దారితీస్తుందని మా డేటా సూచించింది. 8-అనిలినోనాఫ్తలీన్-1-సల్ఫోనిక్ యాసిడ్ ఫ్లోరోసెన్స్ అస్సేను ఉపయోగించి ప్రోటీన్ డీనాటరేషన్ యొక్క నిర్మాణాత్మక కొలతలను ఉపయోగించి గతి విశ్లేషణల నుండి ఫలితాలు ధృవీకరించబడ్డాయి.