జర్నల్ ఆఫ్ మైక్రోబియల్ & బయోకెమికల్ టెక్నాలజీ

నైరూప్య

మిథైలోట్రోఫిక్ ఈస్ట్ పిచియా పాస్టోరిస్‌లో కోడాన్-ఆప్టిమైజ్డ్ కారికా బొప్పాయి పపైన్ సీక్వెన్స్ యొక్క వ్యక్తీకరణ

నికోల్ వెర్నర్, థామస్ హిర్త్, స్టెఫెన్ రూప్ మరియు సుసానే జిబెక్

సిస్టీన్ ఎండోప్రొటీజ్ పాపైన్ అనేది పారిశ్రామిక అనువర్తనాల కోసం విస్తృతంగా ఉపయోగించే మొక్కల ప్రోటీజ్‌లలో ఒకటి. అయితే బొప్పాయి మొక్కల రబ్బరు పాలు నుండి పాపైన్‌ని సాంప్రదాయకంగా వేరుచేయడం ప్రపంచవ్యాప్తంగా కవర్ చేయలేదా? డిమాండ్. పారిశ్రామిక అనువర్తనాల కోసం పాపైన్ ఉత్పత్తిని పెంచడానికి, దాని రీకాంబినెంట్ ఉత్పత్తి కోసం గత సంవత్సరాల్లో అనేక వ్యక్తీకరణ వ్యవస్థలు అధ్యయనం చేయబడ్డాయి. Eschericha coliలో వ్యక్తీకరణ ఫలితంగా కరగని ప్రోటీన్ చేరడం, బాకులోవైరస్/కీటకాల వ్యవస్థ మరియు Saccharomyes సెరెవిసియాలో వ్యక్తీకరణ పెద్ద-స్థాయి ఉత్పత్తికి సరిపోని కరిగే ప్రోటీన్ యొక్క తక్కువ దిగుబడికి దారితీసింది. పిచియా పాస్టోరిస్ జాతులు X33 (Mut+) మరియు KM71H (Muts)లో సింథటిక్ కోడాన్-ఆప్టిమైజ్ చేయబడిన ప్రొపపైన్ సీక్వెన్స్ యొక్క వైవిధ్య వ్యక్తీకరణను ఇక్కడ మేము వివరించాము. రీకాంబినెంట్ ప్రొపాపైన్ కరిగే ప్రోటీన్‌గా వ్యక్తీకరించబడుతుంది మరియు α- ఫ్యాక్టర్ సిగ్నల్ పెప్టైడ్ ద్వారా సంస్కృతి మాధ్యమంలో స్రవిస్తుంది. సంక్లిష్ట మాధ్యమంలో సాగు చేసినప్పుడు మట్స్ జాతిలో అత్యధిక కార్యకలాపాలు పొందబడ్డాయి. Ni-NTA క్రోమాటోగ్రఫీ ద్వారా శుద్ధి చేసిన తర్వాత 463 mg/L రీకాంబినెంట్ ప్రొపపైన్ ప్రోటీన్ సాలబ్లిలైజేషన్ మరియు రీఫోల్డింగ్ తర్వాత E. coliలో ఇప్పటివరకు అత్యధికంగా నివేదించబడిన ప్రొపపైన్ దిగుబడితో పోల్చదగినది మరియు బొప్పాయి రబ్బరు పాలు నుండి కమర్షియల్ పాపైన్ లాగా ఒక నిర్దిష్ట కార్యాచరణతో పొందబడింది.