జర్నల్ ఆఫ్ స్టెమ్ సెల్ రీసెర్చ్ & థెరపీ

నైరూప్య

మానవ కెరటినోసైట్‌ల కోసం సంస్కృతి మాధ్యమం యొక్క మూల్యాంకనం

ఫాబియానా రెజీనా జేవియర్ బాటిస్టా, జుస్సారా రెహదర్ మరియు మరియా బీట్రిజ్ పుజ్జీ

కణజాల మరమ్మత్తు మరియు క్లినికల్ అప్లికేషన్‌ను లక్ష్యంగా చేసుకుని పునరుత్పత్తి చేయడంలో వర్తించే చర్మం యొక్క కణజాల ఇంజనీరింగ్ కోసం మానవ కెరాటినోసైట్‌లు అవసరం. కణాల విస్తరణను నిర్వహించేటప్పుడు తక్కువ సమయంలో అధిక కణ సాంద్రతలను కలిగి ఉండటం చాలా అవసరం. ఈ కణాల పెరుగుదల మరియు నిర్వహణ సాధారణంగా MCDB 153 మాధ్యమం యొక్క వినియోగాన్ని కలిగి ఉంటుంది, ఇది వృద్ధి కారకాలు మరియు పిండం బోవిన్ సీరం (FBS) వంటి జంతు-ఉత్పన్నమైన భాగాలతో అనుబంధంగా ఉంటుంది. కెరాటినోసైట్ విస్తరణ కోసం MCDB 153 మాధ్యమం ఆధారంగా విభిన్న సూత్రీకరణలను మూల్యాంకనం చేయడం ఈ పని యొక్క లక్ష్యం. దాని కోసం, 24 కారకాల రూపకల్పనను ఉపయోగించి చర్మ కణ సంస్కృతికి ఏ సప్లిమెంట్లు ముఖ్యమైనవో నిర్వచించడానికి అనేక ప్రయోగాలు గ్రహించబడ్డాయి. ప్లాస్టిక్ సర్జరీ ఆపరేషన్ అయిన డెర్మోలిపెక్టమీకి సమర్పించిన నలుగురు సమ్మతి పొందిన రోగుల నుండి చర్మ నమూనాలను పొందారు . ఈ శకలాలు 0.25% ట్రిప్సిన్-EDTAతో నాలుగు గంటల పాటు 37ºC వద్ద చికిత్స చేయబడ్డాయి. ఇంకా, ఎపిడెర్మిస్ చర్మం నుండి వేరు చేయబడి, చర్మ కణాలను అందిస్తుంది. 25 cm2 ఫ్లాస్క్‌లతో పాటు 6 మరియు 96-బావి ప్లేట్లలో బ్యాచ్ సంస్కృతులు ప్రదర్శించబడ్డాయి. ఇన్సులిన్ (7.5 µg.mL-1), బోవిన్ పిట్యూటరీ ఎక్స్‌ట్రాక్ట్-BPE (80 µg.mL-1), ఎపిడెర్మల్ గ్రోత్ ఫ్యాక్టర్-EGF (0.08 µg) కలిగిన MCDB 153 మాధ్యమంలో కెరాటినోసైట్‌లు పూర్తిగా పెరిగాయని కణాల పెరుగుదల మరియు జీవక్రియకు సంబంధించిన ఫలితాలు చూపించాయి. .mL-1), హైడ్రోకార్టిసోన్ (0.63 µg.mL-1) మరియు గ్లుటామైన్ (1 gL-1). మరోవైపు, ప్రయోగాత్మక రూపకల్పనలో ప్రతిపాదించబడిన సంస్కృతి మాధ్యమం సంతృప్తికరమైన కణాల పెరుగుదలకు దారితీయలేదు. అదనంగా, చాలా సందర్భాలలో ప్రారంభ గ్లూకోజ్ సాంద్రత తక్కువగా ఉన్నప్పటికీ, లాక్టేట్ 1 gL-1కి చేరుకునే కణాల ద్వారా బలంగా ఉత్పత్తి చేయబడుతుంది.