గ్లోబల్ జర్నల్ ఆఫ్ బయాలజీ, అగ్రికల్చర్ & హెల్త్ సైన్సెస్

నైరూప్య

యాంటీ రో-గామా గ్లోబులిన్ ఉత్పత్తి యొక్క పారిశ్రామిక ప్రక్రియ నియంత్రణలో Igg-anti-D (rho) పరిమాణం కోసం ఫ్లో సైటోమెట్రీ అస్సే రూపకల్పన, ఆప్టిమైజేషన్ మరియు ధ్రువీకరణ

సెర్గియో ఎ ఓవిడో, సుసానా విటాలి, జార్జ్ జార్జుర్

నవజాత శిశువు యొక్క హిమోలిటిక్ వ్యాధికి ప్రధాన కారణాలలో ఒకటి, వారి ఎర్ర రక్త కణాలలో D యాంటిజెన్ లేని గర్భిణీ తల్లులలో నిరంతర యాంటిజెనిక్ సవాలుకు ప్రతిస్పందనగా, యాంటీ-డి ప్రతిరోధకాలను ఉత్పత్తి చేయడం. సంక్లిష్టతలను నివారించడానికి, గర్భిణీ స్త్రీలలో యాంటీ-డి యాంటీబాడీ స్థాయిల పర్యవేక్షణ నిర్వహించబడుతుంది మరియు యాంటీ-డి ఇమ్యునోగ్లోబులిన్ (ఐజిజి యాంటీ-డి)తో రోగనిరోధకత ద్వారా సున్నితత్వం నిరోధించబడుతుంది. ఈ రోజు వరకు, ప్లాస్మా మరియు పూర్తయిన ఉత్పత్తులలో యాంటీ-డి యొక్క పర్యవేక్షణ మరియు టైట్రేషన్ (IgG యాంటీ-డి) టెక్నికాన్ ఆటోఅనలైజర్, రేడియో ఇమ్యునో అస్సే (RIA) మరియు ఎంజైమో ఇమ్యునో అస్సే (EIA)తో నిరంతర ప్రవాహ విశ్లేషణను నిర్వహిస్తుంది. మా ప్రయోగశాలలో, గామా-రో UNC యొక్క యాంటీ-డి యాంటీబాడీస్ మరియు విస్తరణ ప్రక్రియ యొక్క ఉత్పత్తుల పరిమాణీకరణ కోసం, యూరోపియన్ ఫార్మకోపోయియా యొక్క సూచన పద్ధతికి ప్రత్యామ్నాయ పరీక్షగా ఫ్లో సైటోమెట్రీ యొక్క "హౌస్ మేడ్" టెక్నిక్ అభివృద్ధి చేయబడింది. గామాగ్లోబులిన్, సెమీ-ప్రాసెస్డ్ మరియు హ్యూమన్ ప్లాస్మా యొక్క వాణిజ్య తయారీలో యాంటీ-డి యాంటీబాడీస్ యొక్క సాంద్రతను కొలవడానికి పాలిక్లోనల్ యాంటీ-రో యాంటీబాడీస్ మరియు యాంటీ FITC (ఫ్లోరోసెసిన్ ఐసోథియోసైనేట్) -లేబుల్ చేయబడిన హ్యూమన్ IgG ఉపయోగించబడ్డాయి. యాంటీ-డి IgG (69/419) కోసం 1వ అంతర్జాతీయ WHO ప్రమాణాన్ని ఉపయోగించి ఈ పద్ధతి అభివృద్ధి చేయబడింది. పద్ధతిలో ఉపయోగించిన ఎర్ర కణాల సాంద్రత వద్ద (5 x 104 కణాలు/ul) ఆటో సంకలనం ద్వారా ఎటువంటి జోక్యం ఉండదు. పొందిన డోస్ రెస్పాన్స్ కర్వ్ (MFI vs. లాగ్ C) దత్తత తీసుకున్న పని పరిధిలో సరళంగా ఉంది, ఇది 0.99 సహసంబంధ గుణకాన్ని ప్రదర్శిస్తుంది. నిర్దిష్టత మరియు పునరుద్ధరణ పరీక్షలు సంతృప్తికరంగా ఉన్నాయి, ప్రతికూల నియంత్రణలు ఫ్లోరోసెన్స్ యొక్క తక్కువ స్థాయిలను చూపించాయి మరియు నిర్ణయంలో తీవ్రమైన జోక్యాన్ని ప్రదర్శించలేదు. ఎర్ర రక్త కణం ద్వారా యాంటీ-డి సైట్‌ల యాంటిజెన్ స్థాయిలు, ఫినోటైప్ ప్రకారం మారతాయని తెలుసుకోవడం, మా ఫలితాలు R1R1 ఫినోటైప్‌లతో కూడిన గ్లోబుల్స్ ఈ పరీక్ష కోసం ఉత్తమ పనితీరును ప్రదర్శిస్తాయని మరియు అవసరమైతే R1R2 కణాల ద్వారా భర్తీ చేయవచ్చు. NIBSC మరియు యూరోపియన్ ఫార్మాకోపోయియా యొక్క నిపుణుల సమూహం N°6B యొక్క ప్రమాణాలను అనుసరించి ఈ పద్ధతి ధృవీకరించబడింది, వారు యాంటీ-డి యొక్క అంచనాలో వర్తించే ఇదే విధానాన్ని ప్రామాణికం చేశారు. ఫ్లో సైటోమెట్రీ అనేది యాంటీ-డి (100-0.9 ug/ ml) యొక్క వివిధ సాంద్రతలలో మరియు పూర్తి ఉత్పత్తి, ముందుగా నింపిన ఏకాగ్రత ఉత్పత్తి మరియు కోన్ పద్ధతి యొక్క భిన్నం II వంటి విభిన్న జీవ మాత్రికలలో ఖచ్చితమైన, ఖచ్చితమైన, సున్నితమైన మరియు నిర్దిష్ట నిర్ణయాలను పొందేందుకు అనుమతించబడింది. ఈ పద్ధతి యొక్క అనువర్తనంలో కనిపించే ప్రయోజనాలు, సాపేక్షంగా తక్కువ ధరతో పాటు, యాంప్లిఫికేషన్ అవసరం లేని బలమైన ఫ్లోరోసెన్స్ సిగ్నల్, IgM-Anti D లేదా పాలిమర్‌ల ద్వారా సంకలనం ప్రమాదాన్ని తగ్గించే అత్యంత పలుచన నమూనాలను ఉపయోగించడం. యాంటీ-డి యొక్క సీరం స్థాయిలను గుర్తించడానికి లేదా ఇమ్యునోగ్లోబులిన్ ద్రావణంలో ఏకాగ్రతను లెక్కించడానికి ఇది సులభమైన, వేగవంతమైన మరియు నమ్మదగిన పద్ధతి.